2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:建立羊椎間盤退變模型;應(yīng)用腺相關(guān)病毒(adeno-associated virus,AAV)介導(dǎo)人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β<,1>(human transforming growth factor-β<,1>,hTGF-β<,1>)和人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(human vascular endothelial growth factor,hVEGF)基因體內(nèi)轉(zhuǎn)染羊退變椎間盤,觀察AAV-hTGF-β<,1>和hVEGF的表達(dá)以及單基因轉(zhuǎn)染和雙基

2、因聯(lián)合轉(zhuǎn)染對(duì)退變椎間盤的生物學(xué)作用。 方法:成年SPF(specific pathogen flee,SPF)級(jí)去勢(shì)山羊,通過(guò)11號(hào)刀片損傷椎間盤前外側(cè)纖維環(huán)的方法建立椎間盤退變模型,造模后4、8、12、24周分別進(jìn)行影像學(xué)和組織學(xué)檢測(cè),觀察造模椎間盤變化。將造模成功動(dòng)物隨機(jī)分為A、B、C、D和E 5組,各組分別于造模椎間盤內(nèi)注射50μL試劑:A組rAAV2-hTGFβ<,1>、B組rAAV2-hVEGF、C組rAAV2-hTG

3、F β<,1>+rAAV2-hVEGF、D組磷酸鹽緩沖液(PBS)、E組rAAV2-EGFP(enhanced green fluorescent protein,EGFP)。轉(zhuǎn)染后2、4、8、12周時(shí)分別進(jìn)行影像學(xué)、組織學(xué)和生物化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果: (1)影像學(xué)和組織學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明造模動(dòng)物椎間盤發(fā)生緩慢、可靠的退行性變。 (2)基因轉(zhuǎn)染后椎間盤的變化 ①影像學(xué)檢測(cè):A組、C組動(dòng)物椎問盤高度指數(shù)(disc

4、height index,DHI)均高于D組,C組更顯著,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;B組與D組無(wú)顯著性差異。 ②組織學(xué)檢測(cè):HE、Safranine 0染色后觀察到A組、C組動(dòng)物椎間盤細(xì)胞數(shù)目減少量、結(jié)構(gòu)紊亂程度、髓核纖維環(huán)界限模糊程度等均低于D組。B組與D組無(wú)顯著性差異。免疫組化染色后觀察到:A組、C組動(dòng)物椎間盤髓核中Ⅱ膠原含量下降程度、纖維環(huán)中Ⅰ膠原含量下降程度均低于D組,C組更顯著,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,B組與D組無(wú)顯著性差異;轉(zhuǎn)染兩

5、周后,A組、B組和C組的rAAV2-hTGF β<,1>、rAAV2-hVEGF和rAAV2-hTGF β<,1>+rAAV2-hVEGF較D組顯著增多;E組動(dòng)物轉(zhuǎn)染后12周仍可觀察到EGFP的表達(dá)。 ③生物化學(xué)檢測(cè):A組、C組動(dòng)物椎間盤Ⅰ、Ⅱ型膠原和蛋白多糖的含量下降程度均低于D組,C組更顯著,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;B組與D組無(wú)顯著性差異。 結(jié)論: (1)本方法可以成功建立一種椎間盤退變動(dòng)物模型; (2)r

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