CD3單抗加白消安聯(lián)合氟達(dá)拉賓預(yù)處理方案在小鼠半相合造血干細(xì)胞移植中預(yù)防GVHD的作用研究.pdf

1、目的：明確在建立的白消安聯(lián)合氟達(dá)拉賓化療預(yù)處理小鼠半相合造血干細(xì)胞移植（Haploidentical hematopoietic stem cell transplantation, Haplo-HSCT）移植物抗宿主?。℅raft versus host disease, GVHD）模型上，加用CD3單抗能夠預(yù)防GVHD，并初步探討其機(jī)制。
　　方法：應(yīng)用白消安聯(lián)合氟達(dá)拉濱預(yù)處理方案化療、以C57BL/6小鼠和BALB/C小鼠雜

2、交的子一代小鼠（CB6F1）為受者，以C57BL/6為供者建立半相合造血干細(xì)胞移植GVHD模型。將CB6F1小鼠分為3組，Anti-CD3聯(lián)合化療預(yù)處理組(Anti-CD3組)以CD3單抗聯(lián)合白消安和氟達(dá)拉濱預(yù)處理；化療預(yù)處理組(SPL組)和對照組(BM組)以白消安聯(lián)合氟達(dá)拉濱預(yù)處理。Anti-CD3組和SPL組移植C57BL/6的骨髓細(xì)胞和脾細(xì)胞，BM組只移植供者骨髓細(xì)胞。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證供者細(xì)胞的植入、在受者淋巴組織的比例以及整合

3、素的表達(dá)情況，并通過觀察受者小鼠移植后小鼠體重變化和生存率、aGVHD的臨床評分和靶器官的組織病理及評分等方法，對比anti-CD3組和SPL組GVHD模型小鼠的aGVHD的嚴(yán)重程度，受者各器官中供者T淋巴細(xì)胞的浸潤情況以初步探測CD3單抗作用機(jī)制。
　　結(jié)果：①預(yù)處理方案的確定：確定白消安15ug/g和氟達(dá)拉濱10 ug/g，每天兩次，共4天的預(yù)處理化療為理想的預(yù)處理化療方案。確定CD3單抗用量為5 ug/g，于移植前13天和8

4、天各給藥一次。②成功建立半相合造血干細(xì)胞移植aGVHD模型：觀察到典型的體重減輕、腹瀉、弓背、脫毛等aGVHD臨床癥狀；流式驗(yàn)證供者CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、B細(xì)胞成功植入；病理切片見受者GVHD靶器官組織有明顯的淋巴細(xì)胞浸潤。③CD3單抗預(yù)處理預(yù)防GVHD的療效：Anti-CD3組生存率明顯高于SPL組（P<0.01）；體重下降較SPL組緩慢；GVHD癥狀沒有或較 SPL組減輕；靶器官病理組織 GVHD評分較SPL組明顯減輕（P