定量檢測TRECs在異體造血干細胞移植中的作用和意義研究.pdf

1、目的：分析T細胞受體重排刪除環(huán)（T-cell receptor rearran-gement excision circles，TRECs）水平的變化，評價異體造血干細胞移植（allo-HSCT）后T細胞免疫重建的情況。
　　 方法：收集接受allo-HSCT治療的11名白血病患者移植前、移植之后4周內(nèi)、4-8周、9-12周等不同時間點的外周血樣本，臨床觀察移植后并發(fā)癥（如移植物抗宿主?。╣raft versus host di

2、sease，GVHD）發(fā)生及原發(fā)病復發(fā)的情況。分離外周血單個核細胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMNCs）后，采用間接免疫熒光法檢測CD45RA+和CD45RO+細胞陽性率，提取DNA后采用實時定量PCR定量檢測TRECs水平，結果以“TRECs拷貝數(shù)1000個PBMNCs”表示。
　　 結果：CD45RA細胞陽性率在allo-HSCT后4周內(nèi)明顯低下，隨后逐步上升，至allo-HS

3、CT后9～12周又出現(xiàn)少許回落：而CD45RO細胞陽性率在HSCT后逐漸升高，至allo-HSCT后9～12周才出現(xiàn)明顯降低；allo-HSCT4周內(nèi)、4～8周時間段的CD45RA+細胞/CD45RO+細胞的比值與allo-HSCT前相比均有所減小，提示allo-HSCT后8周內(nèi)以CD45RO+細胞的擴增為主?；颊遖llo-HSCT前的外周血TRECs水平平均為0.8546±1.30272拷貝/1000 PBMNCs。在allo-HSC

4、T后4周內(nèi)，外周血TRECs水平稍許上升，4周后明顯下降，9～12周仍平穩(wěn)于較低狀態(tài)。有GVHD史移植病人的外周血TRECs水平顯著降低，明顯低于無GVHD史移植病人的外周血TRECs水平，甚至趨于基線水平。TRECs還可能作為allo-HSCT相關的預后因子，外周血TRECs水平低下可能預示移植后的早期復發(fā)。
　　 結論：結合T細胞亞群和TRECs等指標，對allo-HSCT后的T細胞免疫重建進行定期監(jiān)測，能夠更為確切地評價移