多聚次黃嘌呤胞嘧啶核苷酸poly(I：C)對人臍血樹突狀細胞功能影響的研究.pdf

1、目的：觀察多聚次黃嘌呤胞嘧啶核苷酸(polyriboinosmic polyribocytidylic acid，polyI:C，P)對人臍血來源樹突狀細胞(dendritic cells，DC)體外成熟的影響，及探討polyI:C對人臍血樹突狀細胞(DC)介導的抗白血病效應。 方法：密度梯度離心法分離臍血單個核細胞(CB-MNC)，對照組以RPMI-1640培養(yǎng)液誘導CB-MNC生成DC，實驗各組分別用加有P、重組人粒細胞-巨

2、噬細胞集落刺激因子(rhGM-CSF)+重組人腫瘤壞死因子α(rhTNF-α)+重組人白細胞介素-4(rhIL-4)(GIT)及GIT+P(GITP)的RPMI-1640培養(yǎng)液誘導CB-MNC生成DC。光鏡下觀察DC形態(tài)，臺盼藍拒染法計數(shù)活細胞數(shù)，用流式細胞儀檢測各組細胞免疫表型，并將細胞涂片行瑞氏-姬姆薩染色液染色，油鏡下觀察并攝片。從臍血中分離出單個核細胞(同前)，對照組、實驗組均以GIT誘導DC，并于DC培養(yǎng)第4d、第9d加入HL

3、-60細胞。于培養(yǎng)第7d，實驗組分別加入不同濃度的polyI：C，培養(yǎng)不同的時間。光鏡下觀察DC形態(tài)，并收獲培養(yǎng)第12天的DC，應用流式細胞儀檢測DC免疫表型后，將DC與急粒緩解期患者外周血淋巴細胞混合，誘導抗原特異性細胞毒T淋巴細胞，MTT法檢測其殺傷活性。 結果：①各實驗組均得到一定數(shù)量的典型DC；P組CD1a+、CD83+細胞比例高于對照組；GITP組CD83+細胞比例升高最明顯，高于GIT組。②多聚次黃嘌呤胞嘧啶核苷酸p

4、olyI:C濃度與作用時間對CD1a+細胞比例均無影響；實驗組的CD83+細胞比例及殺傷活性均高于對照組，在一定的范圍內，隨著濃度的增大、作用時間的延長，CD83+細胞比例增大，殺傷活性亦增強。 結論：①多聚次黃嘌呤胞嘧啶核苷酸polyI:C不僅能促進臍血DC體外快速成熟，還能協(xié)同rhGM-CSF、rhIL-4、rhTNF-α促進DC體外擴增；②多聚次黃嘌呤胞嘧啶核苷酸polyI：C能促進DC的快速成熟、擴增、增強DC抗原提呈能