樹突狀細(xì)胞分泌的exosomes聯(lián)合環(huán)磷酰胺和Poly I：C的抗腫瘤作用研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)的目的是證明exosomes聯(lián)合Poly I：C和環(huán)磷酰胺的抗腫瘤效果。本實(shí)驗(yàn)通過細(xì)胞因子誘導(dǎo)骨髓來源的造血干細(xì)胞分化為髓系樹突狀細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞L1210的凍融抗原負(fù)載樹突狀細(xì)胞，超速離心結(jié)合膜過濾的方法提取樹突狀細(xì)胞分泌外泌體。為了觀察Poly I：C促DC成熟的作用，體外在imDC培養(yǎng)體系中加入Poly I：C，流式檢測(cè)DC表面分子的變化，發(fā)現(xiàn)Poly I：C刺激后DC表面I-A／I-E,CD80,CD86,CD11c的表達(dá)上

2、調(diào)。用得到的外泌體在DC存在的情況下刺激脾細(xì)胞，應(yīng)用cck-8試劑盒測(cè)量脾細(xì)胞的增殖，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為加入exosomes組平均吸光度為(0.90±0.22)，未加exosomes組平均吸光度為(0.53±0.1 3)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Exosomes刺激脾細(xì)胞制備抗原特異性的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)，通過DIOC—18聯(lián)PI的方法測(cè)定脾細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，實(shí)驗(yàn)得到負(fù)載腫瘤抗原的exosomes刺激的脾細(xì)胞在體外能夠殺傷腫瘤細(xì)胞

3、L1210，在效靶比分別為5：1和10：1時(shí)實(shí)驗(yàn)組的殺傷率分別為(21.19±3.99)％、(30.5±3.85)％，對(duì)照組的殺傷率分別為(17.544±4.48)％、(19.38±4.68)％，10：1時(shí)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比殺傷率有顯著性差異。L1210細(xì)胞接種小鼠，制備荷瘤小鼠模型，exosomes聯(lián)合CTX和PolyI:C對(duì)荷瘤小鼠進(jìn)行治療，觀察腫瘤的生長(zhǎng)速度，小鼠的生存期。通過實(shí)驗(yàn)得到exosomes能延長(zhǎng)荷瘤小鼠的生存期；應(yīng)用C