杜仲多糖對環(huán)磷酰胺抗腫瘤增效減毒作用及其機制的研究.pdf

1、杜仲（Eucommia ulmoides Oliv EUO）又名思仙、思仲、木棉等，在我國南自五嶺，北至長城的廣闊地區(qū)普遍種植，是我國特有的植物資源。杜仲入藥已有兩千多年的歷史，《神農(nóng)本草經(jīng)》將其列為“藥之上品”，具補中益氣，堅筋骨，強志，安胎，久服輕身耐勞之功效?！吨兴幋筠o典》和《本草綱目》中載杜仲歸經(jīng)入肝，腎經(jīng)。杜仲多糖（Eucommia ulmoides Oliv Polysaccharides，EOP）是從杜仲科植物杜仲的干燥樹

2、皮中提取出的水溶性糖性成分，明確的組分有Gonda等[2]從杜仲皮中分離的酸性聚多糖杜仲糖A（Eucomman A）和Tomoda等[3]提取的杜仲糖B（Eucomman B）。杜仲糖A是由L-阿拉伯糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸按摩爾比8：6：4：5：8組成；杜仲糖B是近年來發(fā)現(xiàn)的杜仲又一活性成分，結(jié)構(gòu)主要為α-1，2-1-鼠李糖-α-1，4-d-半乳糖。 環(huán)磷酰胺（Cyclophosphamide，C

3、P）是治療惡性腫瘤最常用的烷化劑代表藥物，具有廣譜抗癌作用，其主要毒副作用--骨髓抑制、肝損傷和免疫抑制等一直是困擾臨床用藥的突出難題。根據(jù)中西醫(yī)結(jié)合治療癌癥的原則，如何將兩者的“互補”作用擴大為“協(xié)同”，是臨床腫瘤化療中一個亟待解決的問題。本課題旨在驗證和闡明EOP對傳統(tǒng)化療藥物CP致小鼠毒性的保護作用，并初步探討其作用機制，為杜仲的進(jìn)一步開發(fā)利用提供實驗和理論依據(jù)。 一、杜仲多糖的提取及其對小鼠S180肉瘤生長的抑制作用

4、 EOP是由杜仲皮經(jīng)脫脂除色素、水提、Sevag法脫蛋白和醇沉四步制的，經(jīng)苯酚-硫酸法測其含量為55.2％。以CP為陽性對照藥，考察EOP對小鼠S180肉瘤生長的抑制作用及對CP骨髓抑制的影響。結(jié)果顯示EOP能夠抑制S180肉瘤的生長，并能夠提升胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，增加骨髓有核細(xì)胞計數(shù)及外周血白細(xì)胞計數(shù)，拮抗CP引起的外周血白細(xì)胞和骨髓有核細(xì)胞減少。 二、杜仲多糖對環(huán)磷酰胺致小鼠骨髓抑制等毒性的影響 本實驗用CP復(fù)

5、制腫瘤化療藥物的毒副作用模型，分析EOP對CP致毒性的保護作用。將實驗小鼠平均分為6組，每組12只，生理鹽水為陰性對照，EOP采用高、中、低3個劑量組?？瞻捉M注射生理鹽水，其余均以腹腔注射CP造模。連續(xù)注射和ig5天，每天稱量小鼠體重，末次給藥禁食不禁水12小時后，摘除小鼠眼球取血測MDA、SOD，然后將小鼠處死取胸腺、脾臟和肝臟分別計算其指數(shù)，另外取肝臟做成勻漿測GSH、ALT，左大腿股骨測其骨髓DNA含量。結(jié)果表明，EOP能有效地拮

6、抗CP所引起的小鼠毒性作用，與模型組相比較，EOP組的體重下降減少，胸腺、脾臟和肝臟指數(shù)升高；SOD、GSH升高， MDA降低；血象測定白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板均有升高，骨髓DNA含量升高，尤以EOP高劑量組作用明顯。 三、杜仲多糖對環(huán)磷酰胺致肝損傷小鼠的保護作用 應(yīng)用CP建立肝損傷模型，給予不同劑量EOP后，測定血清ALT、AST、肝組織的SOD和MDA等各項指標(biāo)。由結(jié)果可知，EOP能顯著降低CP致肝損傷小鼠血清ALT、

7、AST值、肝組織MDA值，并明顯升高肝組織SOD值。 四、杜仲多糖對免疫抑制小鼠的調(diào)節(jié)作用 應(yīng)用CP建立免疫低下小鼠模型，給予不同劑量EOP后，測定小鼠體重、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率、吞噬指數(shù)等指標(biāo)。結(jié)果顯示應(yīng)用CP后小鼠體重、胸腺指數(shù)、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率、吞噬指數(shù)均降低。EOP能減輕CP致小鼠體重的下降，升高免疫低下小鼠胸腺指數(shù)，明顯增加小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率、吞噬指數(shù)和脾臟指數(shù)。 五、杜仲多糖對