創(chuàng)傷后異位骨化發(fā)病機理及干預研究.pdf

1、本文對創(chuàng)傷后異位骨化發(fā)病機理及干預進行了研究。本研究分為三個部分：
　　 第一部分：
　　 目的：通過固定并施加暴力相結合手法和肌肉間植入自體骨髓兩種方法誘導動物形成異位骨化，初步探討其形成機制，為異位骨化的研究奠定實驗基礎。
　　 方法：制備動物模型：⑴用新西蘭白兔10只,進行強力被動扭轉、暴力按摩,造成右膝關節(jié)及周圍軟組織損傷,然后用石膏固定右膝關節(jié)和踝關節(jié)于伸直位，不固定右髖關節(jié)。每天最大范圍活動膝關節(jié)5

2、min，活動后重新固定；石膏干固后將兔放回籠內, 單籠飼養(yǎng)，此操作每周6天持續(xù)5周。10周后行X線和組織學檢查。⑵用新西蘭白兔10只，無菌條件下，先從左股前外側入路，抽取左股骨骨髓2ml，再右股前外側入路，將左股骨中段抽取的自體骨髓注入新西蘭白兔右股骨外側肌肉間，閉合傷口。4周后行X線和組織學檢查。
　　 結果：X線和組織學檢查顯示10周后，行固定并同時施加暴力手法誘導異位骨化的白兔均在右股骨中部周圍出現(xiàn)異位骨；4周后，行肌肉間

3、注入自體骨髓的白兔均在右股骨中部周圍出現(xiàn)異位骨出現(xiàn)異位骨。
　　 結論：固定并同時施加暴力手法和肌肉間注入自體骨髓兩種方法可有效誘導異位骨化，結果穩(wěn)定可靠。
　　 第二部分：
　　 目的：檢測及評價BMP-2、COX-2及VEGF在創(chuàng)傷后異位骨化發(fā)生過程中的表達和作用，探討創(chuàng)傷后異位骨化的發(fā)生機制。
　　 方法：通過對新西蘭白兔固定并同時施加暴力方法構建異位骨化模型，采用免疫組化SP法檢測10例創(chuàng)傷后異位

4、骨化組織及10例正常骨組織中COX-2、BMP-2和VEGF表達水平，利用HPIAS-1000圖像分析系統(tǒng)測定異位骨化組織與正常骨組織COX-2、BMP-2和VEGF的平均光密度和陽性區(qū)域面積百分率，并分析三種蛋白陽性區(qū)域面積百分率之間的相關性。
　　 結果：⑴異位骨化組織中COX-2、BMP-2和VEGF呈高表達；正常骨組織中COX-2、BMP-2和VEGF呈低表達或不表達。圖像分析結果顯示兩組間差異有顯著性意義(P

5、)。⑵異位骨化組織中BMP-2和VEGF與COX-2呈正相關，BMP-2與VEGF呈正相關。
　　 結論：COX-2、BMP-2和VEGF在HO的形成過程中起重要作用，COX-2通過誘導BMP-2和VEGF的表達而促進HO組織中的成骨和血管形成。
　　 第三部分：
　　 目的：研究自由基清除劑依達拉奉對創(chuàng)傷后異位骨化(H0)形成中骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（BMP-2）及環(huán)氧化酶-2（COX-2）表達的調節(jié)作用。

6、　　 方法：54只新西蘭白兔隨機分成實驗組、模型組、對照組，每組18只。實驗組和模型組兔適應性喂養(yǎng)1周后建立H0模型，對照組兔不建立H0模型，操作后第1天即開始給藥。實驗組給予依達拉奉30 mg/次，靜脈滴注，每日2次，模型組和對照組給予等量生理鹽水靜脈滴注。用藥6周和10周模型組和對照組兔分別攝X線片評價H0發(fā)生。用藥6周每組隨機處死半數(shù)新西蘭白兔，10周后處死剩余白兔, 切取H0組織, 免疫組化檢測組織中BMP-2及COX-2的表

7、達。
　　 結果：用藥6周和10周，模型組H0發(fā)生較對照組明顯增多，H0組織中BMP-2和COX-2表達較對照組增多，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；實驗組H0組織中BMP-2和COX-2表達較模型組減少，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。實驗組用藥10周H0組織中BMP-2和COX-2表達較6周減少，有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　 結論：BMP-2及COX-2表達水平上調是創(chuàng)傷后H0發(fā)生的重要機制。自由基清除劑依達拉奉