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文檔簡介
1、研究目的: 應用糖尿病小鼠創(chuàng)面模型,了解糖尿病狀態(tài)下創(chuàng)面愈合的規(guī)律。研究外源性GM-CSF的局部應用對糖尿病小鼠創(chuàng)面愈合的影響,并就其作用機制作初步探討。 研究方法: C57BL/6小鼠72只分為糖尿病組(DM組)和正常對照組(NM組),DM組小鼠用鏈脲佐菌素(STZ)誘導建立DM模型。所有小鼠背部脊柱中線兩側對稱部位切除0.8cm×0.8cm大小全厚層皮膚創(chuàng)面。創(chuàng)面按左側GM-CSF、右側空白凝膠對照用藥,分別
2、于制創(chuàng)后1、3、5、7、10、14 d觀察創(chuàng)面愈合情況,測算創(chuàng)面愈合率;并創(chuàng)區(qū)取材,用病理學技術(HE染色、Masson特殊染色、免疫組化技術)觀察創(chuàng)面再上皮化、炎癥細胞浸潤、膠原纖維沉積及新生血管率;用堿性水解法檢測創(chuàng)面羥脯氨酸濃度,間接反應創(chuàng)面膠原含量;用ELISA技術檢測創(chuàng)面重要炎癥因子(IL-6、TGF-β1)的含量變化,作統(tǒng)計學分析。 研究結果: 1 STZ誘導的DM小鼠模型,具有典型的“三高一低”的臨床癥狀,
3、檢測指標均符合DM動物模型的標準。 2 DM組小鼠創(chuàng)面使用GM-CSF后愈合率明顯提高;NM組雙側對比無明顯差異;各時相點,NM組創(chuàng)面愈合率均明顯高于DM組。 3 DM組和NM組小鼠使用GM-CSF后,創(chuàng)面局部中性粒細胞和巨噬細胞的浸潤均有明顯增加,新生血管再生明顯。 4 DM組小鼠使用GM-CSF后,創(chuàng)面局部各時相點羥脯氨酸含量和膠原纖維的沉積明顯提高;NM組小鼠創(chuàng)面雙側對比無明顯差異。 5 DM組和N
4、M組小鼠使用GM-CSF后,創(chuàng)面局部細胞因子IL-6和TGF-β1濃度明顯高于對側。 結論及意義: 外源性GM-CSF的應用可促進DM小鼠創(chuàng)面中性粒細胞、巨噬細胞的浸潤和新生血管的再生,可增加創(chuàng)面膠原蛋白的含量,提高IL-6和TGF-β1的表達,促進DM小鼠創(chuàng)面的愈合。 外源性GM-CSF的應用也有促進NM小鼠創(chuàng)面中性粒細胞、巨噬細胞的浸潤和新生血管再生的作用,并可提高IL-6和TGF-β1的表達,但對創(chuàng)面局部膠
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