鹵代查耳酮衍生物的合成及其對(duì)膽堿酯酶作用的初步研究.pdf

1、阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease，AD），俗名老年癡呆癥，是一種以進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙和記憶力損害為主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化性疾病。主要癥狀表現(xiàn)為進(jìn)行性記憶減退、失語和行為障礙，最終導(dǎo)致患者完全喪失生活自理能力。它的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜且多樣化，而膽堿能缺失的學(xué)說是較早被公認(rèn)的，且依據(jù)該學(xué)說所研發(fā)乙酰膽堿酯酶抑制劑已經(jīng)是目前臨床上治療AD的主要藥物。查耳酮是在自然界中廣泛存在的類黃酮化合物，且具有多種生物活性。本課題是基于課題組之

2、前成果之上的一個(gè)縱向擴(kuò)展。綜合之前的研究成果，基于鹵原子往往能提高化合物生物活性的特點(diǎn)，本課題設(shè)計(jì)合成了一系列氯代查耳酮含氮衍生物和氟代查耳酮含氮衍生物，以及進(jìn)一步環(huán)合得到的鹵代二氫吡啶類衍生物，并對(duì)其生物活性進(jìn)行了初步的探究，以期在之前研究成果上有新的發(fā)現(xiàn)和突破。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴設(shè)計(jì)并合成了一系列的氯代查耳酮和氟代查耳酮含氮衍生物，以及各活性較強(qiáng)衍生物的環(huán)合物。整個(gè)合成實(shí)驗(yàn)步驟及操作簡(jiǎn)便，且產(chǎn)量較高，副產(chǎn)物較少，利用

3、了1H NMR，紅外等手段對(duì)各目標(biāo)化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。⑵對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行膽堿酯酶活性檢測(cè)，并對(duì)篩選出的高 AChE活性化合物做對(duì)AChE的酶動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明氯代查耳酮衍生物和氟代查耳酮衍生物對(duì)乙酰膽堿酯酶和丁酰膽堿酯酶均有不同程度的抑制活性，且相對(duì)于原不含鹵素取代的查耳酮衍生物對(duì)AChE活性有不同程度的提高，其中氯代化合物 B3L和氟代化合物B3l在同系列化合物中乙酰膽堿酯酶抑制活性最高，IC50值分別達(dá)到了0.17μM和0.

4、20μM，且二者均是同系列衍生物中最具選擇性乙酰膽堿酯酶抑制作用的化合物，其丁酰膽堿酯酶的IC50與乙酰膽堿酯酶的IC50的比值分別達(dá)到了653和65。然后我們對(duì)B3L和B3l進(jìn)行酶動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明它們對(duì)乙酰膽堿酯酶均表現(xiàn)為混合型抑制作用。⑶使用MOE2008軟件進(jìn)一步從分子水平研究目標(biāo)化合物與 AChE蛋白分子的結(jié)合方式，分子模擬結(jié)果表明各氟代、氯代查耳酮衍生物及二氫吡唑衍生物均能同時(shí)與酶催化中心（CAS）和外周活性位點(diǎn)（PAS）

5、結(jié)合，為雙重位點(diǎn)的乙酰膽堿酯酶抑制劑，與酶動(dòng)力學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符。⑷為探究鹵代查耳酮衍生物透過血腦屏障的能力，我們利用HPLC法測(cè)定了目標(biāo)產(chǎn)物的油水分布系數(shù)（logP）。結(jié)果顯示所有目標(biāo)化合物的logP值均處于2.0±0.7范圍內(nèi)，符合化合物透中樞血腦屏障對(duì)log P的要求。此外，鹵代查耳酮二氫吡唑衍生物對(duì)AChE的活性檢測(cè)結(jié)果表明所有化合物均表現(xiàn)出良好的AChE抑制活性，但相比原氯代查耳酮衍生物(C1A-C1D)及氟代查耳酮衍生物(C1