抗膽堿酯酶劑亞致死劑量對棉鈴蟲Helicoverpa armigera（Hubner）乙酰膽堿酯酶誘導作用的研究.pdf

1、該文以棉鈴蟲Helicoverpa armigera(Hubner)敏感品系(SS-H)為對象,系統(tǒng)研究了抗膽堿脂酶劑亞致死劑量對乙酰膽堿酯酶(AChE)的誘導作用,并對棉鈴蟲AChE進行了部分純化,初步研究了棉鈴蟲對殺蟲藥劑耐性的分子機制.具體結(jié)果如下:1.選用3種抗膽堿酯酶劑亞致死劑量(LD<,10>)處理棉鈴蟲3齡幼蟲24h后,測定存活幼蟲對辛硫磷、馬拉硫磷、滅多威、溴氰菊酯和高效氯氰菊酯5種殺蟲藥劑敏感度的變化.結(jié)果顯示不同抗膽

2、堿酯酶的誘導作用不同,導致棉鈴蟲對不同殺蟲藥劑敏感度的變化存在差異.2.辛硫磷亞致死劑量(LD<,10>)誘導棉鈴蟲144h內(nèi),AChE活性下降,對底物(ATCh)的親和力在其誘導的48h內(nèi)無明顯變化.馬拉硫磷和滅多威LD<,10>劑量誘導對棉鈴蟲AChE活性誘導增加效應較為明顯,但48h內(nèi)對底物的親和力卻明顯降低.在對照組K<,m>值明顯升高的72~120h內(nèi),3個處理組K<,m>值同本組其他時間段K<,m>值相比無明顯變化.3.辛硫

3、磷不同劑量對棉鈴蟲幼蟲AChE比活力存在一定的抑制作用;馬拉硫磷和滅多威對AChE的誘導則是隨著劑量的增加,存在先抑制后誘導增加的作用.相同劑量下,滅多威的誘導增加效應較馬拉硫磷明顯.4.辛硫磷LD<,10>劑量連續(xù)誘導棉鈴蟲4代,對AChE比活力和V<,max>作用表現(xiàn)為先抑制后誘導增加,但變化幅度較小.馬拉硫磷和滅多威LD<,10>劑量誘導棉鈴蟲幼蟲兩代后,對乙酰膽堿酯酶的誘導作用不明顯.長期誘導過程中,三種藥劑LD<,10>劑量均

4、明顯影響昆蟲生長發(fā)育.5.比較研究了棉鈴蟲兩個敏感品系(SS-N和SS-H)和一個抗性種群(山東陽谷,RR-Y)對3種抗膽堿酯酶劑的耐藥性,同SS-N品系相比,RR-Y對辛硫磷、馬拉硫磷和滅多威的抗性分別為7,13和20倍.同SS-H品系相比,SS-N品系對三種藥劑更敏感.動力學研究表明棉鈴蟲3個品系A(chǔ)ChE的比活力和V<,max>沒有顯著差異,而AChE對底物ATCh的親和力(K<,m>)RR-Y卻顯著低于敏感品系.采用RT-PCR技

5、術(shù)從棉鈴蟲成蟲頭部克隆了AChE基因片段并制備探針進行Southern雜交,證明在有機磷和氨基甲酸酯抗性棉鈴蟲中不存在乙酰膽堿酯酶基因的擴增.對抗膽堿酯酶劑亞致死劑量各處理組AChE Southern雜交表明,在亞致死劑量處理后,對AChE活性的誘導作用不是由于乙酰膽堿酯酶基因的擴增.6.抗膽堿酯酶劑亞致死劑量處理24h后,對棉鈴蟲AChE的密度梯度心結(jié)果顯示,處理前后AChE活性分布的變化在各梯度層差異顯著,可能是由于抗膽堿酯酶劑亞致

6、死劑量處理使棉鈴蟲AChE分子型的亞基結(jié)合發(fā)生改變造成的.棉鈴蟲對照及處理組AChE不同分子型敏感度的研究表明,對毒扁豆堿及滅多威抑制均相對敏感的5.3S AChE和只對毒扁豆堿的抑制相對敏感的8.7S AChE,處理后其I<,50>值與對照相比明顯升高,預示抗膽堿酯酶劑亞致死劑量引起的AChE活性和對底物親和力的改變,可能是某些分子型分布比例及其對抑制劑敏感的AChE分子型敏感度發(fā)生改變的綜合效應.7.采用CEA親和層析法對棉鈴蟲AC