PPARγ配體對(duì)擴(kuò)張型心肌病大鼠心功能的影響及可能機(jī)制探討.pdf

1、目的：觀察PPARγ配體羅格列酮對(duì)阿霉素誘導(dǎo)的擴(kuò)張型心肌病(DCM)大鼠心功能和心室重構(gòu)的影響，并從炎癥、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡的角度探討可能機(jī)制。 方法： 一、PPARγ,配體對(duì)擴(kuò)張型心肌病心力衰竭的影響： SD大鼠隨機(jī)分為三組：正常對(duì)照組(C組，n=10)，擴(kuò)張型心肌病心力衰竭組(D組，n=10)，擴(kuò)張型心肌病心力衰竭+羅格列酮組(D+R組，n=10)。采用阿霉素腹腔注射(2mg/kg/×8w)的方法建立DCM模

2、型，羅格列酮(3mg/kg/d×8w)在心衰模型建立后給予。實(shí)驗(yàn)第19周采用超聲心動(dòng)圖檢測(cè)各組左室舒張末徑(LVEDD)、左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)等參數(shù)，血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)左室內(nèi)壓最大上升、下降速率(±dp/dt max)等指標(biāo)，并行HE、VG染色觀察病理學(xué)改變及測(cè)定膠原容積百分比(CVF)。 二、PPARγ配體預(yù)處理對(duì)擴(kuò)張型心肌病的影響： SD大鼠隨機(jī)分為三組：正常對(duì)照組(CP組，n=10)，擴(kuò)張型心肌病組(DP組，n=1

3、0)，擴(kuò)張型心肌病+羅格列酮組(D+RP組，n=10)。采用阿霉素腹腔注射(2mg/kg/w×8w)的方法建立DCM模型，在阿霉素首次注射前4周開(kāi)始給予羅格列酮(3mg/kg/d×14w)。實(shí)驗(yàn)第15周用超聲心動(dòng)圖檢測(cè)各組LVEDD、LVEF，血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)±dp/dtmax等指標(biāo)；取血后處死大鼠，取出心臟稱重，分離左室、右室，計(jì)算各組左室重量指數(shù)(LVWI)和右室重量指數(shù)(RVWI)；HE、VG染色觀察心肌病理學(xué)改變，測(cè)定CVF；RT

4、-PCR法檢測(cè)各組心肌中PPARγmRNA表達(dá)；放射免疫法檢測(cè)各組血清和心肌中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)濃度；比色法檢測(cè)各組心肌總抗氧化能力(TAOC)和丙二醛濃度(MDA)；Western-blot法觀測(cè)各組大鼠心肌中凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Fas、Fas-L的表達(dá)，比較藥物干預(yù)對(duì)上述指標(biāo)的不同影響。結(jié)果： 一、PPARγ配體對(duì)擴(kuò)張型心肌病心力衰竭的影響：

5、 1.D+R組與D組相比，LVEDD[(7.2±0.4)mm vs(6.94±0.2)mm，P＞0.05]、LVEF[(76.04±1.6)％vs(75.64±2.5)％，P＞0.05)]、+LVdp/dtmax [(3631.414±273.9)mmHg/s vs(355 1.54±256.4)mmHg/s，P＞0.05]、-LVdp/dtmax[-(2808.24±197.4)mmHg/s vs-(2785.84±215.0)m

6、mHg/s，P＞0.05]均無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； 2.D+R組與D組心肌壞死程度相似；兩組間CVF無(wú)明顯差異[(12.084±0.93)％vs(11.78±0.62)％，P＞0.05]。 二、PPARγ,配體預(yù)處理對(duì)擴(kuò)張型心肌病的影響： 1.心功能：D+Rp組LVEDD較DP組低[(6.3±0.3)mm vs(6.9±0.4)mm，P＜0.05]，較CP組高[(6.3±0.3)mm vs(5.55±0.4)mm，P

7、＜0.05]；LVEF較DP組高[(84.8±1.7)％vs(78.0±2.2)％，P＜0.05]，較CP組低[(84.84±1.7)％vs (90.34±1.3)％，P＜0.05]；+dp/dtmax較DP組高[(4557.14±285.7)mmHg/s vs (3488.1+470.6)mmHg/s，P＜0.05]，較CP組低[(4557.14±285.7)mmHg/s vs(6045.4±205.0)mmHg/s，P＜0.05]；

8、 -dp/dtmax較DP組高[-(3291.6±26 1.5)mmHg/s vs-(2722.8±201.4)mmHg/s，P＜0.05]，較CP組低[-(3291.6±261.5)mmHg/s vs-(5137.2±183.8)mmHg/s，P＜0.05]。 2.組織學(xué)特征：DP組心肌壞死程度較CP組明顯，D+RP組較DP組改善；D+RP組CVF較DP組明顯減少[(6.91±0.5)％vs(11.55±1.1)％，P＜0.0

9、51，較CP組高[(6.91±0.5)％vs(2.68±0.5)％，P＜0.05]；D+Rp組LVWI較DP組低(2.00±0.14 vs 2.43±0.11，P＜0.05)，較CP組高(2.00±0.14 vs 1.73±0.06，P＜0.05)；D+Rp組RVWI較DP組低(0.63±0.04 vs 0.77±0.03，P＜0.05)，較CP組高(0.63±0.04 vs 0.40±0.04，P＜0.05)； 3.PPARγ

10、mRNA表達(dá)：D+Rp組心肌內(nèi)PPARγmRNA的表達(dá)較DP組有提高(0.65±0.03 vs 0.34±0.03，P＜0.05)，較CP組少(0.65±0.03 vs 0.92±0.05，P＜0.05)。 4.炎癥因子表達(dá)：D+RP組血清和心肌組織中TNF-α均較DP組低[(12.74±1.76)fmol/ml vs(20.5 1±2.02)fmol/ml，P＜0.05；(20.51±1.67)pg/mgprot vs(43.

11、53±2.09)pg/mgprot，P＜0.05]，較CP組高[(12.74±1.76)fmol/ml vs(0)fmol/ml，P＜0.05；(20.5 1±1.67)pg/mgprot vs(2.25±2.91)pg/mgprot，P＜0.05]；D+RP組血清和心肌組織 IL-6均較DP組低[(0.23±0.03)ng/ml vs(0.32±0.02)ng/ml，P＜0.05；(11.67±0.88)pg/mgprot vs(17

12、.39±1.58)pg/mgprot，P＜0.05)]，較CP組高[(0.23±0.03)ng/ml vs (0.15±0.04)ng/ml，P＜0.05；(11.67±0.88)pg/mgprot vs(1.57±1.73)pg/mgprot，P＜0.05]；D+RP組血清和心肌組織中IL-1β均較DP組低[(0.17±：0.04)ng/ml vs(0.25±0.04)ng/ml，P＜0.05；(8.50±1.87)pg/mgprot

13、 vs(11.6±1.20)pg/mgprot，P＜0.05]，較CP組高[(0.17±0.04)ng/ml vs (0.11±0.06)ng/ml，P＜0.05； (8.50±1.87)pg/mgprot vs (3.08±3.27)pg/mgprot，P＜0.05]。 5.氧化應(yīng)激能力：D+RP組心肌抗氧化能力(T-AOC)較DP組高[(1.37±0.20)U/mgprot vs(1.00±0.16)U/mgprot，P＜

14、0.05]，較CP組低[(1.37±0.20)U/mgprot vs(1.69±0.19)U/mgprot，P＜0.05]；D+RP組心肌MDA較DP組低[(3.63±0.68)nmol/mgprot vs(5.63±0.66)nmol/mgprot，P＜0.05]，較CP組高[(3.63±0.68)nmol/mgprot VS(2.19±0.42)nmol/mgprot，P＜0.05]。 6.凋亡蛋白表達(dá)：D+RP組分別與DP

15、組與和CP組相比，Bcl-2較DP組高(0.36±0.05 vs 0.23±0.03，P＜0.05)，較CP組低(0.36±0.05 vs 0.53±0.05，P＜0.05)；Bax較DP組低(0.34±0.06 vs 0.62±0.07，P＜0.05)，較CP組高(0.34±0.06 vs 0.18±0.03，P＜0.05)；Fas較DP組低(0.32±0.06 vs 0.48±0.05，P＜0.05)，較CP組高(0.32±0.06

16、 vs 0.12±0.04，P＜0.05)；Fas-L 較DP組低(0.24±0.03 vs 0.51±0.08，P＜0.05)，較CP組高(0.24±0.03 vs 0.14±0.02，P＜0.05)。 結(jié)論：在阿霉素誘導(dǎo)的擴(kuò)張型心肌病大鼠心力衰竭形成后應(yīng)用PPARγ配體羅格列酮對(duì)其心功能和心室重構(gòu)無(wú)明顯改善作用，而在阿霉素誘導(dǎo)前預(yù)先使用PPARγ配體羅格列酮?jiǎng)t能有效緩解和減輕擴(kuò)張型心肌病大鼠心力衰竭的程度，其機(jī)制可能與其抑制