大承氣湯對(duì)多器官功能障礙綜合征大鼠小腸平滑肌線粒體凋亡途徑和NF-kB、COX-2蛋白表達(dá)影響.pdf

1、背景:多器官功能障礙綜合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)是指當(dāng)機(jī)體遭受到嚴(yán)重的燒傷、創(chuàng)傷、中毒、感染和休克等傷害后，同時(shí)或序貫發(fā)生兩個(gè)或兩個(gè)以上臟器功能失常最終衰竭的臨床綜合征。MODS不是獨(dú)立的疾病，其發(fā)病原因多，進(jìn)展快，病理機(jī)制復(fù)雜?；几共客饪萍卑Y患者一旦發(fā)生MODS，預(yù)后差，死亡率極高[1]。一般情況下，當(dāng)機(jī)體發(fā)生感染或組織損傷時(shí)，局部的炎癥反應(yīng)對(duì)清除細(xì)菌和修復(fù)損傷組織是十分必

2、要的，并且具有保護(hù)性。但若炎癥反應(yīng)異常放大，就會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損傷作用，導(dǎo)致自身細(xì)胞壞死、組織和器官功能障礙，最終導(dǎo)致MODS的發(fā)生[2]。因此，從本質(zhì)上來說，MODS是機(jī)體炎癥反應(yīng)失控導(dǎo)致的不良結(jié)果。而感染是炎癥反應(yīng)的促發(fā)因素，是MODS的根本原因。目前研究觀點(diǎn)認(rèn)為，胃腸道是MODS發(fā)生的關(guān)鍵部位。腸道是人體內(nèi)最大的“儲(chǔ)菌庫”和“內(nèi)毒素庫”。嚴(yán)重的損傷，如大面積燒傷、大手術(shù)、中毒、感染、嚴(yán)重的創(chuàng)傷和休克等，可導(dǎo)致消化道粘膜屏障損傷。胃腸粘

3、膜發(fā)生糜爛、潰瘍，同時(shí)胃腸道內(nèi)的細(xì)菌滋生、菌群失衡，病菌與內(nèi)毒素進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)導(dǎo)致菌血癥、內(nèi)毒素血癥甚至敗血癥。機(jī)體的炎癥反應(yīng)過度放大，發(fā)生全身炎癥反應(yīng)綜合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS）和MODS[3]。因此胃腸道在MODS發(fā)生發(fā)展中具有重要地位。危重癥患者的預(yù)后和胃腸運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)程度密切相關(guān)，促進(jìn)消化道運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)是救治危重癥患者的關(guān)鍵[4]。
　　目的:研究對(duì)象

4、為Wistar大鼠，建立細(xì)菌性腹膜炎致MODS大鼠模型，測定大承氣湯干預(yù)前后的MODS大鼠模型小腸平滑肌組織中的線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax，和NF-κB、COX-2蛋白的表達(dá)和分布變化。探討MODS致消化系統(tǒng)運(yùn)動(dòng)障礙的病理生理機(jī)制，和大承氣湯促進(jìn)MODS胃腸動(dòng)力恢復(fù)的機(jī)理。
　　方法: Wistar大鼠100只（健康成年清潔級(jí)），雌雄大鼠各50只，體重200-250g。隨機(jī)分組:對(duì)照組（20只）、MODS組(40只)

5、和大承氣湯組(40只)。對(duì)照組大鼠腹腔內(nèi)注射1ml生理鹽水/只;MODS組和大承氣湯組大鼠腹腔內(nèi)注射1ml E.coli.混懸液/只，建立細(xì)菌性腹膜炎致MODS模型。其中大承氣湯組每只大鼠在造模前2天均給予大承氣湯灌胃，每次1ml/100g，2次/日。造模24小時(shí)后取存活大鼠上段小腸組織，予甲醛固定、石蠟包埋。采用免疫組織化學(xué)染色法觀察和檢測大鼠小腸平滑肌組織中線粒體凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax和NF-κB、COX-2蛋白的表達(dá)和分布

6、情況。
　　結(jié)果:大體標(biāo)本與對(duì)照組相比，MODS組大鼠胃腸梗阻癥狀明顯。大承氣湯組大鼠胃腸梗阻情況較MODS組明顯減輕，胃腸蠕動(dòng)功能基本正常。
　　免疫組化法檢測①線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax檢測結(jié)果:與對(duì)照組比較，MODS組大鼠小腸平滑肌組織中Bcl-2蛋白表達(dá)明顯減少(P＜0.05），分布稀疏，而Bax蛋白表達(dá)明顯增多(P＜0.05），分布密集。同MODS組比較，發(fā)現(xiàn)大承氣湯組大鼠小腸肌層組織中的Bax蛋白表

7、達(dá)明顯減少(P＜0.05)，Bcl-2蛋白表達(dá)明顯增多(P＜0.05)，分布密集。②NF-κB、COX-2蛋白檢測結(jié)果:與對(duì)照組比較，MODS組大鼠小腸平滑肌組織中的NF-κB和COX-2蛋白的表達(dá)明顯增多(P＜0.05)，分布密集。同MODS組比較，發(fā)現(xiàn)大承氣湯組大鼠小腸平滑肌組織中的NF-κB和COX-2蛋白的表達(dá)明顯降低(P＜0.05)，且分布疏松。
　　結(jié)論:①細(xì)菌性腹膜炎致MODS大鼠胃腸梗阻癥狀嚴(yán)重，死亡率較高;大承氣

8、湯可以促進(jìn)消化系統(tǒng)的蠕動(dòng)，使胃腸梗阻癥狀明顯緩解，降低MODS大鼠的死亡率。②MODS大鼠小腸肌層中Bax蛋白表達(dá)較對(duì)照組明顯增多，而Bcl-2蛋白表達(dá)明顯減少，線粒體凋亡途徑激活導(dǎo)致小腸平滑肌細(xì)胞凋亡，造成胃腸動(dòng)力障礙;大承氣湯可以增加MODS大鼠小腸平滑肌細(xì)胞中的Bcl-2蛋白表達(dá)，減少Bax蛋白表達(dá)，通過抑制小腸平滑肌細(xì)胞線粒體凋亡途徑從而保護(hù)小腸平滑肌，恢復(fù)消化系統(tǒng)的蠕動(dòng)。③MODS胃腸動(dòng)力障礙可能與小腸平滑肌NF-κ B和CO