L-Selectin靶向微泡聲學(xué)特性的初步實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討靶向脂質(zhì)微泡造影劑增強(qiáng)淋巴結(jié)超聲顯像的可行性，為腫瘤轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的超聲診斷提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。方法：1）采用靜電吸附法將抗兔L-Selectin多克隆抗體結(jié)合到脂質(zhì)膜微泡表面，制備靶向脂質(zhì)膜微泡造影劑；熒光免疫染色實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證抗體與脂質(zhì)膜微泡的結(jié)合；流式細(xì)胞儀檢測(cè)靶向微泡的結(jié)合率；B超聲像圖對(duì)比分析生理鹽水組、普通脂質(zhì)膜超聲造影劑組和L-Selectin靶向脂質(zhì)超聲造影劑組的灰度值。2）建立兔外陰癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)動(dòng)物模型。經(jīng)外周靜脈

2、對(duì)5只實(shí)驗(yàn)兔分別先后注射L-Selectin靶向脂質(zhì)膜超聲造影劑和普通脂質(zhì)膜超聲造影劑，分為第一組、第二組，采用灰階顯像模式（GSIM），利用視頻灰階分析技術(shù)，來(lái)評(píng)價(jià)靶向微泡增強(qiáng)淋巴結(jié)超聲顯像的效果。結(jié)果：1）靶向脂質(zhì)膜微泡的免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)為陽(yáng)性；抗體濃度為5ug/ml、15ug/ml、35ug/ml時(shí)靶向微泡的平均結(jié)合率分別為9.88±1.49％、29.59±2.23％、86.66±4.71％，兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）

3、；生理鹽水組、普通脂質(zhì)膜超聲造影劑（UCA）組和L-Selectin靶向脂質(zhì)超聲造影劑（TUCA）組B超聲像圖的平均灰度值分別為16.64±3.86dB、75.77±7.08dB、73.72±8.19dB。生理鹽水組和UCA組二者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），生理鹽水組和TUCA組二者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），UCA組和TUCA組二者比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。2）5只實(shí)驗(yàn)兔外陰癌腹股溝轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)造影顯像后，視頻定量分

4、析：第一組先注射靶向微泡造影劑后平均灰度值為97.18±8.38dB，后注射脂質(zhì)造影劑后平均灰度值為83.12±2.81dB，前后比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；第二組先注射脂質(zhì)造影劑后平均灰度值為80.27±3.56dB，后注射靶向造影劑后平均灰度值為92.36±9.45dB，前后比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：采用靜電吸附法可成功制備較高結(jié)合率的L-Selectin靶向微泡，結(jié)合率與加入抗體的濃度有關(guān)，同時(shí)在保持了一定的