活血通脈靈對心肌缺血大鼠的保護作用及對P-Selectin、L-Selectin表達的影響.pdf

1、本實驗從冠心病的易患因素高脂血癥著手，依據(jù)冠心病的發(fā)病機制，以高脂飼料配方喂養(yǎng)，形成高脂血癥，在此基礎上，皮下注射異丙腎上腺素，形成心肌缺血的復合模型，使之更符合冠心病的發(fā)病特點。并采用血清學方法、放射免疫法、免疫組織化學法等研究方法來觀察活血通脈靈(HXTML)對心肌缺血損傷大鼠心肌酶、血脂、炎癥因子、黏附分子及心肌細胞結(jié)構(gòu)學等的改變，多層次、多角度探討HXTML防治冠心病的作用機制，為該藥的臨床應用提供可靠的實驗依據(jù)，為冠心病患者中

2、醫(yī)中藥的臨床復方用藥治療和預防提供新的思路和方法。 目的： 探討活血通脈靈對實驗性心肌缺血大鼠心肌損傷的保護作用機制。 方法： 將50只Wistar雄性大鼠隨機分為空白對照組，模型對照組，藥物對照組及活血通脈靈大劑量治療組(HXTMLmax)和活血通脈靈小劑量治療組(HXTMLmin)，每組10只.實驗前記錄肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖，檢測正常者可入選?？瞻捉M普通飼料喂養(yǎng)，其余各組動物高脂飼料喂養(yǎng)，28天后禁食12

3、小時大鼠內(nèi)眥靜脈取血，抽查各組大鼠有顯著差異后，各治療組分別開始灌胃用藥?？瞻捉M和模型組每次給予10ml/kg生理鹽水，藥物對照組給予消心痛2.5mg/kg，用生理鹽水配成等體積混懸液，HXTMLmax組和HXTMLmin組分別給予含生藥47g/kg，23.5g/kg湯劑，以上液體按10ml/kg灌胃，每日一次，連續(xù)12天，正常飲食。隨后連續(xù)3天除空白組外，其余4組大鼠均皮下注射ISO 5mg/kg，復制心肌缺血模型，空白組皮下注射等量

4、生理鹽水，每日一次。各組均在末次皮下注射后45分鐘用20％烏拉坦5ml/kg腹腔注射麻醉，內(nèi)眥靜脈取血1-1.5ml，按試劑盒說明，分別運用CHOD-PAP酶法、GPO-PAP酶法、CAT法測定血清總膽固醇，甘油三酯，低密度脂蛋白，高密度脂蛋白的含量，并用心電圖機標記Ⅱ?qū)?lián)。然后斷頭取血，用全自動生化分析儀檢測血清心肌酶，即肌酸激酶(CK)，其同工酶(CK-MB)，乳酸脫氫酶(LDH)。通過放射免疫法檢測腫瘤壞死因子(TNF)，白介素6

5、(IL-6)。取心尖部心肌組織，進行蘇木素-伊紅(HE)染色，光鏡下觀察病理形態(tài)學改變。并采用ABC染色檢測P選擇素(P-Selectin)和L選擇素(L-Selectin)的表達量。 結(jié)果： 1、各組大鼠血脂的變化與空白組比較，模型組大鼠血脂總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)明顯升高，高密度脂蛋白(HDL-C)下降，差異顯著(P<0.01)，與模型組比較，各治療組血脂的各項指標都有變化，其

6、中大劑量組差異最大，藥物對照組和小劑量組差異較小，但均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。藥物對照組和小劑量組組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.01)。 2、心電圖改變 與實驗前所做心電圖相比，空白組心電圖ST段接近等電位線，T波無明顯降低。與空白組比較，模型組ST段壓低及T波降低明顯(P<0.01)，表明本次復制心肌缺血模型成功。與模型組比較，藥物對照組和中藥治療組ST段及T波壓低較小(P<0.01)，其中中藥治療組較藥物對照組

7、ST段及T波壓低改善更為顯著，有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。但中藥治療組組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 2血清心肌酶三項指標中，模型組較空白組均顯著升高，有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，與模型組比較，藥物對照組和中藥治療組三項指標均降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，但藥物對照組和HXTML大小劑量組三組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 3、血清TNF、IL-6模型組與空白組相比，TNF和IL-6水平均升高(P<

8、0.01)。與模型組比較，藥物對照組及兩個中藥治療組較模型組水平明顯降低(P<0.05或P<0.01)，但藥物對照組及中藥治療組組間差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 4、組織病理損傷空白對照組未見明顯的組織學改變；模型組以心肌大范圍灶性病變，肌纖維腫脹和斷裂，空泡變性，間質(zhì)水腫，炎細胞浸潤為主；藥物對照組和HXTMLmin組較模型組改變輕微，以肌纖維腫脹，局灶性斷裂，少量空泡變性和炎細胞浸潤為主；HXTMLmax組的病理改變

9、最輕，多為炎細胞浸潤。 5、P-Selectin、L-Selectin表達與空白組比較，模型組大鼠P-Selectin和L-Selectin表達均明顯升高，差異顯著(P<0.05或P<0.01)，與模型組比較，各治療組都有不同程度的降低，其中大劑量組差異最大，藥物對照組和小劑量組差異較小，但均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。藥物對照組和小劑量組組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.01)。 結(jié)論： 活血通脈靈對大鼠心肌缺血