包裹阿霉素新型載藥微泡制備及靶向治療腫瘤實驗研究.pdf

1、第一部分包裹阿霉素新型載藥微泡制備及體外緩實驗研究
　　目的: 將包裹阿霉素(ADM)的乳\羥基乙酸共聚物(PLGA)緩釋微球(ADM-PLGA)與帶正電的超聲脂質(zhì)微泡(MB-NH2)表面的氨基通過共價結(jié)合方式相連接，制備包裹ADM的新型載藥微泡，并檢測其基本理化特性、載藥量、包封率、體外緩釋特性及顯影效果。
　　方法: 采用雙乳化法，制備ADM-PLGA，用碳二亞胺法活化ADM-PLGA表面的羧基，在一定條件下，使ADM-

2、PLGA以共價結(jié)合的方式，連接于MB-NH2表面。觀察連接情況、微泡形態(tài)并檢測其粒徑大小。用高效液相色譜法（HPLC）檢測其包封率及載藥量，觀察該新型載藥微泡的體外緩釋藥特性以及對兔肝VX2腫瘤的顯像效果。
　　結(jié)果: 48 h后置于光鏡下觀察，可見ADM-PLGA微球連接于MB-NH2表面，呈花環(huán)狀，分布較為均勻，其平均粒徑為（2.68±0.98）μm。用HPLC測的該新型載藥微泡的載藥量為（8.71±0.46）％，包封率為(8

3、6.11±6.76)％。輻照組與非輻照組的體外釋藥均符合Hignch方程，其結(jié)果無明顯差異性(P＜0.05)，該新型載藥微泡48 h體外累積釋藥量達(dá)到90％以上。經(jīng)兔耳緣靜脈注射后，兔肝實質(zhì)明顯持續(xù)增強(qiáng)，VX2腫瘤呈“快進(jìn)快退”表現(xiàn)。
　　結(jié)論: 通過共價結(jié)合的方式將ADM-PLGA連接于MB-NH2表面，能夠提高微泡載藥量，延長藥物的作用時間，并且在兔肝VX2腫瘤中顯影效果良好，為采用超聲靶向爆破微泡進(jìn)行藥物定位釋放技術(shù)，提供了

4、一種新型高效的理想載藥微泡系統(tǒng)。
　　第二部分新型載阿霉素微泡聯(lián)合超聲靶向爆破技術(shù)治療兔肝VX2腫瘤實驗研究
　　目的: 觀察聚包裹阿霉素的新型載藥微泡聯(lián)合UTMD靶向治療兔肝VX2腫瘤的效果。
　　方法: 制備裹阿霉素的新型載藥微泡。將30只新西蘭大白兔肝VX2移植瘤模型隨機(jī)分為3組，每組10只。A組為ADM-PLGA輻照組，經(jīng)耳緣靜脈注入5 ml的ADM-PLGA;B組為混合輻照組，經(jīng)耳緣靜脈注入同等劑量的混合溶液

5、（ADM-PLGA+MB-NH2）;C組為新型微泡輻照組(ADM-PLGA-MB-NH2):經(jīng)耳緣靜脈注入相同劑量的新型微泡。3組在注射藥物的同時，均采用頻率為1 MHz、聲強(qiáng)為0.5W/cm2的超聲波經(jīng)皮輻照腫瘤120 s。末次治療24 h后處死荷瘤兔，固定標(biāo)本，送檢行PCNA和TUNEL檢測。比較各組的腫瘤生長率、免疫組化法檢測VX2腫瘤增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)，用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)檢測VX2腫瘤細(xì)胞的凋亡情

6、況，并計算增值指數(shù)(PI)與凋亡指數(shù)(AI)。
　　結(jié)果: A、B、C組腫瘤的生長率分別為（80.13±4.34）％，（59.66±7.93）％及（50.47±9.69）％，C組腫瘤生長率與A、B組的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。A、B、C組腫瘤增值指數(shù)分別為(74.82±7.25)％、（60.77±8.48)％及（55.94±6.97)％,C組與A、B組的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。A、B、C組凋亡指數(shù)分別為（31