15例ARVC-D患者的臨床分析及DSG2基因突變檢測(cè).pdf

1、致心律失常性右室心肌?。ˋRVC/D）是一種以纖維、脂肪組織進(jìn)行性取代心肌組織的顯性遺傳性疾病，伴有不完全外顯，由此導(dǎo)致右室擴(kuò)大及起源于右室的室性心律失常，可表現(xiàn)為心悸、暈厥發(fā)作、心力衰竭或心源性猝死。ARVC/D最早由Marcus等人描述，他們?cè)谟^察到一組右室擴(kuò)大的病人，臨床表現(xiàn)為室性心動(dòng)過(guò)速、室上性心律失常、右心衰或無(wú)癥狀右室擴(kuò)大，最后由活檢或尸檢證實(shí)為本病。由于臨床表現(xiàn)的多樣性，歐洲心臟病學(xué)會(huì)工作組于1994年綜合患者的結(jié)構(gòu)、功能

2、、電生理特點(diǎn)、家族史、遺傳特點(diǎn)制定了本病的診斷標(biāo)準(zhǔn)。 盡管ARVC/D的發(fā)病機(jī)制未完全明了，但是遺傳因素被認(rèn)為是重要因素之一，在一些病例表現(xiàn)為顯性遺傳，研究表明至少有11個(gè)位點(diǎn)和ARVC/D有關(guān)，部分致病基因已被證實(shí)。這其中，ARVC/D8-11型的致病基因可能為橋粒斑蛋白（DSP）、斑菲素蛋白-2（PKP2）、橋粒芯糖蛋白-2（DSG2）、橋粒糖蛋白-2（DSC2），它們共同編碼橋粒蛋白，由此推斷橋粒蛋白的結(jié)構(gòu)破壞在ARVC/

3、D的發(fā)病中發(fā)揮重要的作用。致心律失常性右室心肌?。ˋRVC/D）為常染色體顯性遺傳疾病，主要由編碼細(xì)胞橋粒蛋白的基因突變引起。但由于對(duì)致心律失常性右室心肌?。ˋRVC/D）的基因突變了解還不夠全面、深入、細(xì)致，目前尚不能根據(jù)基因變異對(duì)本病做出診斷并預(yù)測(cè)發(fā)生惡性心律失常的可能性，基因檢測(cè)作用只體現(xiàn)在做為臨床診斷的支持證據(jù)、早期估計(jì)潛在危險(xiǎn)性及進(jìn)一步加深人們對(duì)基因型和表現(xiàn)型之間關(guān)系的了解等方面。我們通過(guò)收集病例，對(duì)其進(jìn)行基因突變檢查，并和西

4、方文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果相比較，試圖發(fā)現(xiàn)中國(guó)南方人群患ARVC/D疾病的遺傳學(xué)特點(diǎn)，進(jìn)而比較可能因種族、地域等產(chǎn)生的差異。 目的: 1、進(jìn)一步分析致心律失常性右室心肌病患者的臨床特點(diǎn)。 2、對(duì)確診為致心律失常性右室心肌病的15名患者進(jìn)行DSG2基因突變檢測(cè)。 方法: 1．收集2000年1月～2007年12月入住我院心內(nèi)科的ARVC/D患者15例。其中男7例，女8例，年齡13～61歲；病程2～21年。所有患

5、者診斷的確立均參照歐洲心臟病學(xué)會(huì)及國(guó)際心臟病學(xué)會(huì)聯(lián)盟制訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)。符合2項(xiàng)主要標(biāo)準(zhǔn)或1項(xiàng)主要標(biāo)準(zhǔn)加2項(xiàng)次要標(biāo)準(zhǔn)或4項(xiàng)次要標(biāo)準(zhǔn)即可診斷本病。本研究入選患者均符合此標(biāo)準(zhǔn)。 2．結(jié)果分析及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：計(jì)量資料用X±S，計(jì)數(shù)資料以率表示，組間比較使用t檢驗(yàn)，以P<0．05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS13．0軟件完成。 3．收集確診為ARVC/D患者的外周血標(biāo)本，酚．氯仿法抽提基因組DNA，采用Yu等設(shè)計(jì)的引物，結(jié)

6、合應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)及單鏈構(gòu)象多態(tài)性電泳技術(shù)（Polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism，PCR-SSCP）分析DSG2基因所有15個(gè)外顯子，若PCR-SSCP發(fā)現(xiàn)異常帶型，則通過(guò)DNA序列測(cè)定了解有無(wú)基因變異，并分析基因變異是否導(dǎo)致氨基酸改變。若PCR-SSCP無(wú)異常發(fā)現(xiàn)，則對(duì)有明確家族史的病例直接進(jìn)行DNA序列測(cè)定以了解有無(wú)基因變異，并分析基因變異

7、是否導(dǎo)致氨基酸改變。通過(guò)此兩種方法發(fā)現(xiàn)的基因變異如有引起氨基酸改變，則與200個(gè)以上正常樣本對(duì)照，以排除基因多態(tài)性。 結(jié)果: 1、15例ARVC/D病例中（7男），入院年齡為13～61（31．2±12．1）歲，首發(fā)癥狀年齡為10～51（28．4±11．2）歲；2例有家族史；6例（40%）有暈厥發(fā)作史；5例（33．3%）患者僅有心悸癥狀；1例常規(guī)心電圖檢查中發(fā)現(xiàn)Epsilon波，見于右側(cè)胸導(dǎo)聯(lián)V2～3，伴有T波倒置；13例

8、（86．6%）超聲心動(dòng)圖結(jié)果異常，主要為RV擴(kuò)大；4例行MRI檢查：見右室壁脂肪信號(hào)2例，右室壁變薄3例，右心室擴(kuò)大3例；有癥狀的室性心律失?；颊呓邮馨返馔?、β阻滯劑或采用其他抗心律失常藥物治療，但46．6%的患者（7/15）應(yīng)用抗心律失常藥物治療無(wú)效，3例患者接受射頻消融治療，其中有1例患者出現(xiàn)VT復(fù)發(fā)。4例患者植入植入式心臟自動(dòng)復(fù)律除顫器（ICD），其中一例患者因多次自動(dòng)除顫，電池耗竭，而更換ICD。 2、SSCP未發(fā)現(xiàn)異常

9、條帶圖形，對(duì)有家族史的患者經(jīng)DNA直接測(cè)序分析，發(fā)現(xiàn)SNP（單核苷酸多態(tài)性），即第8號(hào)外顯子的861C>T，而氨基酸序列仍為Asn287Asn，未引起編碼的蛋白質(zhì)序列改變，對(duì)其他患者進(jìn)行PCR-SSCP及基因測(cè)序，未發(fā)現(xiàn)新的突變位點(diǎn)，可能和遺傳的異質(zhì)性有關(guān)。 結(jié)論: 1、ARVC/D的臨床表現(xiàn)具有非特異性，心電圖異常是診斷ARVC/D的重要依據(jù)之一，超聲所見右室內(nèi)徑及右室流出道擴(kuò)大與高危組病人顯著相關(guān)，可能是猝死的高危因