山核桃嫁接愈合過程的解剖學(xué)研究及IAA免疫金定位.pdf

1、山核桃(Carya carthayensis Sarg.)是我國(guó)特有的優(yōu)質(zhì)干果和木本油料樹種,具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,但在自然條件下童期長(zhǎng),始果期遲,良種化程度不高,而嫁接能有效縮短童期、提早結(jié)實(shí),改良品種,擴(kuò)大適種范圍,然長(zhǎng)期以來本砧嫁接技術(shù)難度大,成活較困難。 本文利用光學(xué)顯微鏡和透射電子顯微鏡,結(jié)合免疫膠體會(huì)標(biāo)記技術(shù),研究了山核桃本砧嫁接愈合過程中砧穗接合部的解剖結(jié)構(gòu)以及IAA在細(xì)胞中的分布。旨在豐富和完善山核桃本砧嫁接技術(shù)及

2、其理論依據(jù),揭示山核桃嫁接過程中內(nèi)源IAA在細(xì)胞中的分布及變化,探討IAA在山核桃嫁接愈合過程中發(fā)揮作用的機(jī)制,為IAA調(diào)控山核桃嫁接愈合過程的深入研究奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)論如下： 1、山核桃本砧嫁接愈合過程大致分為4個(gè)階段：隔離層的形成、增厚及砧穗初始粘連(1-6 d);愈傷組織的生長(zhǎng)與隔離層的解體、消失(7-12 d);砧穗間維管束橋的形成與貫通(14-23 d),維管組織的分化與連接(24-40 d)。嫁接后愈合組織區(qū)域最

3、先發(fā)生的變化是隔離層的消長(zhǎng)。砧、穗形成層區(qū)域最先形成隔離層,嫁接后第1-3 d形成隔離層,第3-6 d逐漸加厚；此后隔離層兩側(cè)愈傷組織細(xì)胞進(jìn)行活躍分裂活動(dòng),隔離層細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)逐漸被吸收,愈傷組織細(xì)胞分裂后突破隔離層,至嫁接后第12 d隔離層完全解體消失,已有篩分子分化；至嫁接后第14 d開始,隨著管狀分子的分化,維管束橋逐漸分化并貫通,40 d左右愈合過程基本結(jié)束,砧穗連為一體,信息傳遞和物質(zhì)交換順利進(jìn)行。隔離層開始形成到完全消失的過程中

4、,隔離層兩側(cè)愈傷組織細(xì)胞進(jìn)行旺盛的生理代謝活動(dòng),切口外側(cè)細(xì)胞的胞間連絲迅速關(guān)閉,而內(nèi)側(cè)細(xì)胞的胞間連絲物質(zhì)交換活躍；近隔離層的細(xì)胞之間部分細(xì)胞壁降解,細(xì)胞間的原生質(zhì)體穿壁融合：高爾基體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器數(shù)量顯著增加,多泡體、壁旁體等膜狀結(jié)構(gòu)頻繁出現(xiàn),淀粉粒先積累后逐漸消失。 2、利用免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)和電鏡技術(shù)研究了山核桃嫁接愈合過程中游離IAA在細(xì)胞中的免疫金定位,表明：山核桃嫁接面愈傷組織細(xì)胞IAA的免疫反應(yīng)特異性強(qiáng),金