USPIO增強MR在大鼠膠原誘導性關節(jié)炎中的應用研究.pdf

1、目的:
　　建立大鼠膠原誘導性關節(jié)炎（CIA）模型，一方面觀察超微超順磁氧化鐵粒子(USPIO)增強后不同序列及不同時間點大鼠膝關節(jié)滑膜磁共振(MR)信號的改變，探討滑膜巨噬細胞MR成像的優(yōu)選序列及增強后最佳顯影時間;另一方面觀察來氟米特(LEF)干預后大鼠膝關節(jié)滑膜于USPIO增強前后MR的信號變化，探討USPIO增強MR監(jiān)測藥物療效的可行性。
　　方法:
　　80只雄性SD大鼠隨機選取24只作為空白組（空白A組、空

2、白B組、空白C組），其余用于構建大鼠CIA模型。將雞Ⅱ型膠原與完全弗氏佐劑充分乳化，于大鼠尾背部皮下多點注射，空白組同時同法注射等量生理鹽水。將造模成功大鼠隨機分為模型組（模型A組、模型B組、模型C組）、LEF組、模型對照組。模型組及空白組于初次免疫28天行增強前掃描，平掃結束后立即尾靜脈注射USPIO，模型A組及空白A組于初次免疫29天行增強后24h掃描，模型B組及空白B組于初次免疫30天行增強后48h掃描，模型C組及空白C組于初次免

3、疫31天行增強后72h掃描;初次免疫28天-41天，每日灌胃予LEF組大鼠LEF8mg/kg，期間予模型對照組大鼠等體積蒸餾水，初次免疫42天、43天分別行USPIO增強前及增強后24hMR掃描。各組MR掃描序列為T1WI SE、T2WI SE及T2*WI GRE序列。各組大鼠于相應時間增強掃描結束后全部處死，留取后肢膝關節(jié)滑膜，中性福爾馬林固定24h后石蠟包埋制成切片，行常規(guī)蘇木素-伊紅(HE)染色觀察炎細胞浸潤及滑膜增生情況、普魯士

4、藍染色觀察滑膜組織內鐵粒子的分布、CD68免疫組化染色觀察滑膜組織巨噬細胞的浸潤情況并對陽性細胞進行計數(shù)。應用Image J軟件測USPIO增強前后各時間點磁共振圖像膝關節(jié)滑膜信號強度（SI滑膜）、同一層面膝關節(jié)旁正常肌肉信號強度（SI肌肉）及背景噪聲標準差(SD)，根據(jù)公式計算滑膜信噪比(SNR)、滑膜/肌肉對比噪聲比(CNR)及滑膜增強前后SNR變化(△SNR)。采用SPSS18.0軟件進行統(tǒng)計分析。
　　結果:
　　(

5、1)造模成功大鼠共40只，成功率71.42％(40/56)，免疫后第12天開始發(fā)病。
　　(2) T1WI模型組大鼠膝關節(jié)滑膜于USPIO增強前后各時間點未見明顯信號改變，各時間點滑膜信噪比(SNR)、滑膜/肌肉對比噪聲比(CNR)無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);T2/T2*WI示增強后24h滑膜信號強度較增強前明顯減弱，增強后24h、48h滑膜SNR及滑膜/肌肉CNR較增強前均降低(P＜0.05)，增強后72h滑膜SNR及滑膜/肌

6、肉CNR與增強前比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);增強后各時間點滑膜信噪比改變(△SNR)于增強后24h最明顯。
　　(3) T1WI LEF組與模型對照組大鼠膝關節(jié)滑膜于USPIO增強前后均未見明顯信號改變，增強后24h滑膜SNR及滑膜/肌肉CNR較增強前均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);T2/T2*WI兩組于增強后24h可見明顯滑膜信號衰減，增強后24h滑膜SNR及滑膜/肌肉CNR較增強前均降低(P＜0.05);LEF組增強

7、前后滑膜信噪比改變(△SNR)較模型對照組弱(P＜0.05)。
　　(4)模型組大鼠滑膜HE染色示滑膜增生、血管翳形成、炎癥細胞浸潤，CD68免疫組化染色示巨噬細胞浸潤，普魯士藍染色見鐵粒子沉積于巨噬細胞內，增強后24h滑膜內鐵粒子沉積較多，增強后48h、72h滑膜內鐵粒子沉積逐漸減少;LEF組炎癥細胞浸潤及鐵粒子沉積較模型對照組均減少，對LEF組及模型對照組CD68陽性巨噬細胞進行計數(shù)，分別為20.17/HPF、32.50/HP