PPARγ在大鼠膠原誘導性關節(jié)炎滑膜中的表達及意義.pdf

1、目的:觀察大鼠膠原誘導性關節(jié)炎模型(CIA)滑膜組織中過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)的表達情況,以及PPARγ激動劑羅格列酮對 NF-κB、TNF-α、IL-1β表達的影響,探討類風濕關節(jié)炎臨床治療的新靶點。
　　方法:(1)健康雄性 Sprague Dawley(SD)大鼠隨機分為2組:正常對照組、造模組,造模組中又分為模型組、給

2、藥7天組、對照7天組、給藥14天組、對照14天組。光鏡觀察滑膜組織形態(tài);免疫組織化學法檢測滑膜組織中PPARγ和NF-κB的蛋白表達情況;半定量反轉錄 PCR檢測大鼠滑膜 PPARγmRNA表達水平;ELISA法測定大鼠外周血中TNF-α和IL-1β的含量。(2)所有數據采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件分析。
　　結果:(1)大鼠膠原誘導性關節(jié)炎模型的評估:于造模后第21天進行關節(jié)炎指數評分,造模組與正常組關節(jié)炎評分比較,P<0.0

3、5,兩組有顯著差異;(2)病理形態(tài)學檢查顯示:正常對照組中,滑膜由1～2層滑膜細胞組成,無增生,細胞排列整齊,滑膜組織中無炎性細胞浸潤;造模組中,滑膜細胞水腫,有3～5層增生,細胞排列不整齊,滑膜組織中有大量的炎性細胞浸潤;(3)免疫組織化學結果顯示:PPARγ表達的細胞定位為細胞漿,棕黃色顆粒為陽性,正常組滑膜組織染色為陰性;模型組、對照7天組、對照14天組滑膜組織染色為弱陽性～中等陽性;給藥7天組、給藥14天組滑膜組織染色為中等陽性

4、～強陽性。給藥14天組表達程度最高,陽性率83.33％,多為++～+++;給藥7天組陽性率66.67％,多為+～++;模型組、對照7天組、對照14天組陰性和弱陽性表達居多。NF-κB表達的細胞定位為細胞漿,棕黃色顆粒為陽性,正常組滑膜組織染色為陰性;模型組、對照7天組、對照14天組滑膜組織染色為中等陽性～強陽性;給藥7天組、給藥14天組滑膜組織染色為陰性～中等陽性。模型組表達程度最高,陽性率75.00％,多為++～+++;給藥7天組陽性

5、率33.33％,多為+～++;(4)反轉錄 PCR檢測結果顯示:造模后 PPARγmRNA的表達增加;造模組中,給藥7天與14天相比,隨著給藥時間延長,PPARγmRNA的表達也隨之增加;與正常組比較,模型組 P<0.05;與給藥7天組比較,對照7天組 P<0.05;與給藥14天組比較,對照14天組 P<0.05;與模型組比較,給藥各組 P<0.05,有統(tǒng)計學意義;(5) ELISA法檢測結果顯示:給藥組與造模組相比,大鼠外周血 TNF

6、-α和IL-1β的水平明顯降低,即:與正常組比較,模型組 P<0.05;與給藥7天組比較,對照7天組 P<0.05;與給藥14天組比較,對照14天組 P<0.05;與模型組比較,給藥各組 P<0.05,有統(tǒng)計學意義。
　　結論:大鼠膠原誘導性關節(jié)炎模型是類風濕關節(jié)炎基礎研究較為理想的動物模型。造模成功后,大鼠滑膜組織 PPARγ的表達上調,給予 PPARγ激動劑羅格列酮后, PPARγ蛋白的表達水平與 PPARγmRNA的表達均增