局部低溫對兔骨骼肌缺血再灌注損傷的保護作用及IL-6在其中的表達.pdf

1、背景與目的:
　　隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展和人類壽命逐漸延長，動脈粥樣硬化的發(fā)病率與日俱增。隨之而來的便是動脈缺血性疾病。目前，治療動脈缺血性疾病的方法多種多樣，如各種轉(zhuǎn)流手術(shù)、動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)、Fogarty導(dǎo)管取栓術(shù)及導(dǎo)管介入球囊擴張術(shù)等，雖然可以快速恢復(fù)血流供應(yīng)，但同時亦可導(dǎo)致“缺血再灌注損傷”(Ischemia Reperfusion Injury，IRI)的發(fā)生，使病人預(yù)后轉(zhuǎn)差，降低了臨床治療的成功率。目前基礎(chǔ)及臨床研究的重

2、點即為如何避免或降低IRI對病人預(yù)后的影響。主要集中在人體重要器官（如腦、心肌、肺等），對于骨骼肌的研究較少。而骨骼肌作為人體主要的動力器官，其對缺血的耐受力較低，恢復(fù)組織灌注后較容易產(chǎn)生IRI，故對骨骼肌IRI的研究就顯得尤為重要。本實驗通過建立兔后肢缺血再灌注模型，探討局部低溫對IRI的保護作用以及從炎癥反應(yīng)的角度探討局部低溫對IRI的保護作用機制，為IRI提供新的防治途徑。
　　方法:
　　取成年兔36只，雌雄不限，體

3、重2-2.5kg，隨機分為A、B、C、D、E、F，共6組，每組6只。實驗動物于術(shù)前12小時禁食水，腹腔推注3％水合氯醛5ml/kg麻醉，麻醉成功后將動物仰臥位固定于手術(shù)臺上。備皮、消毒鋪巾后，沿股動脈走行切開皮膚約10cm，顯露股神經(jīng)血管束，游離出股動脈約5cm。利用無創(chuàng)血管夾夾閉股動脈，以自制止血帶置于股動脈、股靜脈和股神經(jīng)下方阻斷動脈側(cè)枝循環(huán)，并保持股靜脈回流通暢，建立模型。A組為對照組，B組為IRI組，C組為再灌注后局部溫度10℃

4、組，D組為再灌注后局部溫度15℃組，E組為再灌注后局溫度控制20℃組，F(xiàn)組為再灌注后局部溫度控制25℃組。血流阻斷時間4小時。上述A、B、C、D、E、F組分別于再灌注后1小時、2小時、4小時、8小時、12小時給予右心房穿刺取血，檢測血清中肌酸激酶(creatine kinase CK)、乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase LDH)及白介素6(IL-6)的表達水平。于缺血再灌注4小時后取手術(shù)肢體的脛后肌組織約0.6g，

5、其中0.3g左右修剪后放于事先注滿福爾馬林溶液的試管中進行HE染色，觀察肌肉組織細微結(jié)構(gòu)變化，剩余肌肉檢測肌肉濕干比(W/D)。
　　結(jié)果:
　　1.再灌注后血清中LDH、CK、IL-6水平的比較
　　再灌注4小時后血清中LDH、CK水平經(jīng)統(tǒng)計比較，A組各時間點無明顯差異(P＞0.05);C組、D組和E組與B組比較水平下降，有顯著統(tǒng)計學(xué)差異，(P＜0.05)。F組各時間點與B組比較水平上升(P＜0.05)。IL-6水平

6、經(jīng)統(tǒng)計學(xué)比較A組各時間點無明顯差異(P＞0.05);B組各時間點水平較其它實驗組均高，在4小時時達到最高值為41.50±4.59，C組、D組、E組和F組與B組比較各時間點都有不同程度的下降(P＜0.05)。
　　2.肌肉干濕比的比較
　　再灌注后4h后，與A組相比各實驗組肌肉均有不同程度的水腫(P＜0.05)。C組再灌注4h后肌肉濕干比為4.78±0.87，較其它各實驗組均低，肌肉水腫程度最輕，差異有顯著性意義(P＜0.05