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1、該課題組在對(duì)γδT細(xì)胞在抗腫瘤免疫中的作用及其機(jī)制的研究中發(fā)現(xiàn),從腫瘤組織中擴(kuò)增得到的腫瘤組織浸潤(rùn)的γδT淋巴細(xì)胞(γδTIL)的γδTCR V區(qū)具有腫瘤抗原特異性.我們將卵巢上皮癌患者組織進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)TCR δ鏈CDR<,3>基因亞型多呈多克隆表達(dá),具有長(zhǎng)度多樣性,與Ig重鏈的CDR<,3>區(qū)相似,在TCR γδ的抗原識(shí)別過(guò)程中具有重要的意義.我們根據(jù)實(shí)驗(yàn)室基因測(cè)序結(jié)果,推導(dǎo)出相應(yīng)的γδ TIL TCRδ鏈CDR<,3>短肽的氨基酸
2、序列.依據(jù)片段的長(zhǎng)度及等電點(diǎn)等,從卵巢癌腫瘤組織的γδTIL TCRδ鏈CDR<,3>短肽中選擇合成命名為OT<,10>和OT<,3>二條CDR<,3>短肽用于TCR的分析與鑒定.該實(shí)驗(yàn)在上述工作的基礎(chǔ)上,將人工合成的CDR<,3>短肽OT<,10>和OT<,3>用生物素標(biāo)記,以卵巢癌腫瘤細(xì)胞株細(xì)胞和多種其它非卵巢癌腫瘤細(xì)胞株細(xì)胞為材料,以正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)為對(duì)照,通過(guò)免疫熒光染色流式細(xì)胞儀分析技術(shù)和激光共聚焦掃描顯微鏡
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