藍(lán)狐(Alopex lagopus)微衛(wèi)星位點(diǎn)的篩選及遺傳特征的初步評價(jià).pdf

1、藍(lán)狐（Alopex lagopus）、銀狐（Vulpes logpus）是我國重要的毛皮經(jīng)濟(jì)動物，其飼養(yǎng)歷史悠久，但我國藍(lán)銀狐飼養(yǎng)存在譜系管理不清、近親繁殖、遺傳管理不合理等許多問題。而微衛(wèi)星DNA在研究遺傳多樣性分析、基因組作圖、QTL定位、疾病診斷與病理研究、親緣關(guān)系鑒定及個(gè)體識別等方面發(fā)揮著巨大的作用，因此將微衛(wèi)星引入到藍(lán)銀狐的飼養(yǎng)當(dāng)中可以很好的解決以上問題。然而目前國內(nèi)外對狐類動物的微衛(wèi)星分離的研究很少。
　　本文以藍(lán)狐基

2、因組DNA樣品為材料，經(jīng)Sau3 AⅠ酶切并電泳后回收300bp～900bpDNA片段，經(jīng)過與生物素標(biāo)記的(CA)15探針雜交，再用MagneSphere(@)MagneticSeparation Products磁珠（購自Promega公司）富集和PCR擴(kuò)增后，構(gòu)建了微衛(wèi)星富集文庫。利用PMD-18載體上的序列設(shè)計(jì)一條引物分別與(CA)10N、(TG)10N進(jìn)行PCR反應(yīng)來檢測陽性克隆，并將陽性克隆送去測序。共得到55個(gè)含有微衛(wèi)星的序

3、列。篩選并選擇了6個(gè)多態(tài)性較好微衛(wèi)星序列，利用丙烯酰胺凝膠分析了飼養(yǎng)條件下藍(lán)狐、銀狐對各個(gè)位點(diǎn)等位基因數(shù)目、等位基因片段大小范圍、等位基因頻率分布、觀察雜合度等指標(biāo)，結(jié)果顯示:6對微衛(wèi)星引物的在30個(gè)藍(lán)狐樣本中平均有效等位基因數(shù)(Ne)，介于1.3245～5.7515，平均值為3.2594;期望雜合度介于0.245～0.8261之間，平均值為0.507;觀望雜合度介于0.1613～0.8125之間，平均值為0.4751;多態(tài)信息含量介于

4、0.24～0.8001之間，平均多態(tài)性信息含量為0.5115。6個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)在30個(gè)銀狐樣本中平均有效等位基因數(shù)(Ne)介于1～5.3248之間，平均值為2.9578;期望雜合度介于0～0.8122之間，平均值為0.5487;觀望雜合度介于0～0.6之間，平均值為0.3404;多態(tài)信息含量介于0～0.7455之間，平均多態(tài)性信息含量為0.4161。
　　通過上述諸方面的分析研究，得到以下結(jié)論:通過篩選得到的這6個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)可以作為