131F-antiAFP McAb導(dǎo)向納米粒靶向肝癌療效的實驗研究.pdf

1、目的:1.制備阿霉素牛血清白蛋白納米粒(DOX-BSA-NP)，觀察其形態(tài)、粒徑及藥物緩釋規(guī)律。2.制備并初步鑒定131I-antiAFP(甲胎蛋白單抗)導(dǎo)向阿霉素白蛋白納米粒(131I-antiAFP(-)DOX-BSA-NP)。3.觀察131I-AFP單抗導(dǎo)向阿霉素白蛋白納米粒對荷瘤裸鼠的體內(nèi)抗肝癌療效。
　　 方法:1.DOX-BSA-NP制備:以阿霉素、牛血清白蛋白為材料，采用去溶劑化法制備阿霉素白蛋白微球(DOX-BS

2、A-NP);采用透射電鏡觀察其形態(tài)及顆粒大小;采用胰蛋白酶消化方法測定DOX-BSA-NP的載藥量和包封率，觀察體外釋藥性質(zhì)。2.131I-antiAFP-DOX-BSA-NP制備:采用SPDP交聯(lián)法制備單抗導(dǎo)向的載阿霉素免疫毫微球，采用透射電鏡觀察其形態(tài)及顆粒大小;凝膠電泳測定其共價連接。3.培養(yǎng)人肝癌細胞株，建立人肝癌荷瘤裸鼠模型30只，隨機分為5組，每組6只:分為空白對照（生理鹽水）組（A組）、131(I)治療組（B組）、131I

3、-antiAFP治療組（C組）、131I-antiAFP-DOX-BSA-NP治療組（D組）、antiAFP-DOX-BSA-NP治療組（E組）。治療后觀察21天，繪制腫瘤體積生長曲線。計算注藥后各組腫瘤的生長率。第21天處死，取腫瘤組織，HE染色行病理學(xué)檢查。核素相關(guān)治療組（B、C、D組）行核醫(yī)學(xué)檢查，于第1、2、4、7天行SPECT顯像，并計算不同時間不同組別之間的腫瘤區(qū)放射性計數(shù)。
　　 結(jié)果:1.DOX-BSA-NP外觀

4、呈紅色，電鏡下呈圓球狀，分散均勻;平均粒徑大小約160nm，分布均勻，載藥量約為1.8％，包封率為90.3％，體外釋藥持續(xù)緩慢，第7天時，累積釋藥分數(shù)達到95％。2.采用SPDP交聯(lián)方法制備的131I-antiAFP-DOX-BSA-NP成球形，粒徑大小約330nm-400nm。3.荷瘤裸鼠體內(nèi)治療21天后，抑瘤曲線發(fā)現(xiàn)，C組與其他組比較抑瘤效果具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);病理學(xué)腫瘤組織切片發(fā)現(xiàn)D組腫瘤組織壞死較其余組明顯。核素相關(guān)

5、治療B、C、D三組比較，D組放射性計數(shù)高于B組和C組，D組腫瘤區(qū)放射性計數(shù)與B組和C組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，但C組與D組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05）。
　　 結(jié)論:1.采用去溶劑化法可成功制備具有緩釋效果的阿霉素白蛋白納米粒。2.SPDP方法可以將131I標記的單克隆抗體與載藥微球連接，制備出具有免疫功能的納米粒。3.荷瘤裸鼠肝細胞癌移植瘤治療后，各治療組均有效。其中，131I-antiAFP-DOX-BS