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文檔簡介
1、目的:
1.檢測大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后不同時間SynCAM 1、SNAP-25及Synaptotagmin 1(Syt1)的表達(dá)變化。
2.觀察SD大鼠行為功能變化,進(jìn)行神經(jīng)功能評分,探討SAH后認(rèn)知功能的損害與SynCAM 1、SNAP-25及Synaptotagmin 1的表達(dá)之間的聯(lián)系。
方法:
1.分組及模型制作:將42只雄性SD大鼠隨機(jī)分成為正常組(n=6),對照組(n=6)和SAH后1天
2、組(n=6),SAH后3天組(n=6),SAH后5天組(n=6),SAH后7天組(n=6),SAH后14天組(n=6),應(yīng)用視交叉前池一次注血法制成大鼠SAH模型。
2.觀察SD大鼠行為功能變化,進(jìn)行神經(jīng)功能評分。
3.對照組于2天后處死大鼠,SAH1天組、SAH3天組、SAH5天組、SAH7天組、SAH14天組分別于術(shù)后1、3、5、7、14天后處死大鼠,取腦顳葉皮層、海馬組織、小腦做標(biāo)本。
4.Weste
3、rn blot分析及免疫組化分析:通過Western blot法及免疫組化法測定SynCAM 1、SNAP-25及Synaptotagmin 1(Syt1)在腦顳葉皮層、海馬組織、小腦中的表達(dá)。
結(jié)果:
1.與對照組相比,SAH組大鼠神經(jīng)認(rèn)知功能明顯降低,食欲及活動能力明顯降低。
2.SynCAM 1在正常組與對照組的皮層、海馬、小腦中都呈現(xiàn)高水平表達(dá),皮層中,SAH后1-5天的蛋白水平明顯降低(第1天P<
4、0.01,第3天P<0.05,第5天P<0.05);海馬中,SAH后1-7天的蛋白水平明顯降低(第1天P<0.01,第3天P<0.01,第5天P<0.05,第7天P<0.05);小腦中,SAH后1-7天的蛋白水平明顯降低(第1天P<0.01,第3天P<0.01,第5天P<0.01,第7天P<0.05),在SAH后14天SynCAM 1的表達(dá)與對照組無明顯差異(P>0.05)。
3.SNAP-25在正常組與對照組的皮層、海馬、小
5、腦中都呈現(xiàn)高水平表達(dá),皮層中,SAH后1-5天的蛋白水平明顯降低(第1天P<0.01,第3天P<0.05,第5天P<0.05);海馬中,SAH后1-7天的蛋白水平明顯降低(第1天P<0.01,第3天P<0.01,第5天P<0.05,第7天P<0.05);小腦中,SAH后1-7天的蛋白水平明顯降低(第1天P<0.01,第3天P<0.01,第5天P<0.01,第7天P<0.05),在SAH后14天SynCAM1的表達(dá)與對照組無明顯差異(P>
6、0.05)。
4.Synaptotagmin 1在正常組與對照組的皮層、海馬、小腦中都呈現(xiàn)高水平表達(dá),皮層中,SAH后1-5天的蛋白水平明顯降低(第1天P<0.01,第3天P<0.05,第5天P<0.05);海馬中,SAH后1-7天的蛋白水平明顯降低(第1天P<0.01,第3天P<0.01,第5天P<0.05,第7天P<0.05);小腦中,SAH后1-7天的蛋白水平明顯降低(第1天P<0.01,第3天P<0.01,第5天P<0
7、.01,第7天P<0.05),在SAH后14天SynCAM 1的表達(dá)與對照組無明顯差異(P>0.05)。
結(jié)論:
1.通過構(gòu)建大鼠SAH模型,能夠觀察到大鼠SAH后神經(jīng)認(rèn)知功能明顯降低。
2.SynCAM 1、SNAP-25及Synaptotagmin 1在蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦顳葉皮層、海馬組織、小腦中的表達(dá)均有下降趨勢,至14天時基本恢復(fù)正常。由此可已看出SynCAM 1、SNAP-25及Synaptota
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