2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩92頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、乳腺癌是一種是危害女性健康最常見的惡性腫瘤之一,具有發(fā)病率、死亡率高等特點。目前,藥物干預(yù)是乳腺癌的主要治療方法,近年來抗乳腺癌藥物開發(fā)取得了較大的進展,然而由于乳腺癌發(fā)病機制的復(fù)雜性和演變的不可預(yù)知性,還尚未尋找出有效的預(yù)防和治愈乳腺癌的方法。因此,不斷研究開發(fā)新型的抗乳腺癌藥物顯得尤為重要。由于天然植物中所含成分多樣,化學(xué)結(jié)構(gòu)新穎,從天然植物中尋找活性成分,大規(guī)模快速篩選具有抗腫瘤活性的先導(dǎo)化合物,通過化學(xué)結(jié)構(gòu)的修飾與改造,得到低毒

2、、高效的新型藥物是當今抗腫瘤藥物研究與開發(fā)的熱點。
  塔斯品堿是本實驗室采用細胞膜色譜模型首次從陜西秦巴山區(qū)特有藥用植物紅毛七中篩選得到的化合物,具有多種藥理活性,能夠抑菌、抗炎、促進傷口愈合,抑制S180肉瘤生長。本研究通過體外和體內(nèi)實驗考察了塔斯品堿及其結(jié)構(gòu)修飾后的衍生物HMQ1611對乳腺癌生長的影響,并對其作用機制進行了系統(tǒng)研究,旨在為開發(fā)新型的抗乳腺癌藥物提供依據(jù)。本研究的主要內(nèi)容和結(jié)果包括以下幾個方面:
  1

3、.塔斯品堿對乳腺癌的抑制作用
  體外培養(yǎng)乳腺癌細胞ZR-75-30,采用MTT法考察了塔斯品堿對乳腺癌細胞活力的影響,流式細胞術(shù)檢測塔斯品堿對細胞周期和凋亡的影響,western blotting和RT-PCR測定塔斯品堿對ERα及其相關(guān)受體PR mRNA和蛋白表達的影響,結(jié)果表明,塔斯品堿能夠抑制乳腺癌細胞增殖,阻滯細胞周期于 S期,誘導(dǎo)細胞凋亡,下調(diào) ERα和PR表達。建立了ZR-75-30裸鼠移植瘤模型,對塔斯品堿的體內(nèi)抗

4、乳腺癌作用進行了驗證,塔斯品堿連續(xù)給藥后顯著抑制了腫瘤的生長。
  建立了利用 HPLC-MS檢測塔斯品堿作用后兩種 EGFR高表達細胞,A431和HEK293/EGFR細胞內(nèi)和細胞外塔斯品堿的含量的方法,并結(jié)合建立的兩種細胞的細胞膜色譜模型研究了塔斯品堿和EGFR的相互作用,然后采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和實時熒光定量多聚酶鏈反應(yīng)(real-time PCR)考察了塔斯品堿對EGFR mRNA和蛋白表達的影響。結(jié)果顯示,

5、隨著塔斯品堿作用濃度的增加,進入細胞的藥物濃度相應(yīng)增加,塔斯品堿可以作用于細胞膜上的EGFR,抑制細胞 EGFR的表達。以上結(jié)果說明塔斯品堿通過下調(diào)ERα和EGFR的表達,抑制乳腺癌的生長。
  2.塔斯品堿衍生物HMQ1611對乳腺癌的抑制作用
  采用 MTT法考察 HMQ1611對四種乳腺癌細胞活力的影響,流式細胞儀檢測HMQ1611對細胞周期和凋亡的影響,并運用 siRNA干擾和質(zhì)粒 DNA瞬時轉(zhuǎn)染驗證HMQ1611

6、是否以ERα為作用靶點。結(jié)果表明,HMQ1611能夠抑制四種乳腺癌細胞的增殖,阻滯細胞周期于S期,誘導(dǎo)細胞凋亡。HMQ1611對ERα陽性乳腺癌細胞的抑制作用優(yōu)于對ERα陰性乳腺癌細胞,采用siRNA干擾的方法沉默ZR-75-30細胞中ERα表達后,與對照組相比,抑制作用降低,而向 MDA-MB-231細胞中轉(zhuǎn)染 ERα后,與對照組相比,抑制作用增強,說明ERα是HMQ1611的作用靶點。
  采用western blotting

7、和real-time PCR檢測HMQ1611對ERα和EGFR信號通路的影響,結(jié)果顯示,HMQ1611能夠下調(diào)ERα的mRNA和蛋白表達,抑制E2激活的MAPK通路,降低 EGFR磷酸化水平及其下游信號級聯(lián)反應(yīng) MAPK和PI3K/Akt,說明HMQ1611通過下調(diào)ERα mRNA和蛋白表達,阻斷E2的基因組通路和膜ERα所介導(dǎo)的E2激活的MAPK通路,同時抑制EGFR的活性,繼而阻斷其下游的信號級聯(lián)MAPK和PI3K/Akt通路。<

8、br>  建立了ZR-75-30裸鼠移植瘤模型驗證HMQ1611的體內(nèi)抑瘤活性,發(fā)現(xiàn)HMQ1611能夠顯著抑制裸鼠移植瘤的體積和瘤重,并且在整個實驗過程中,與對照組相比HMQ1611給藥組小鼠的體重與對照組相比沒有降低,同時也無其他異常現(xiàn)象發(fā)生。
  3.塔斯品堿衍生物HMQ1611對乳腺癌細胞轉(zhuǎn)移的抑制作用
  采用Millicell小室模型和劃痕實驗?zāi)P涂疾炝薍MQ1611對乳腺癌細胞粘附、遷移和侵襲的影響,采用明膠酶譜

9、法和western blotting實驗檢測了細胞中MMP-2和MMP-9活性和蛋白表達的影響。結(jié)果表明,HMQ1611可以抑制乳腺癌細胞粘附、遷移和侵襲能力,其作用機制是通過抑制MMP-2和MMP-9活性和蛋白表達,抑制了乳腺癌細胞的轉(zhuǎn)移。
  綜上所述,塔斯品堿能夠顯著抑制乳腺癌的生長,可以作為新型的抗乳腺癌先導(dǎo)化合物。對塔斯品堿結(jié)構(gòu)優(yōu)化得到的塔斯品堿衍生物 HMQ1611能夠抑制乳腺癌細胞的侵襲,同時通過作用于ERα和EGF

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論