艾灸以溫促通效應與TRPV1的相關(guān)性研究.pdf

1、背景和目的：艾灸是中醫(yī)臨床治療與防病保健的常用方法，其臨床療效已被廣泛的認可。灸法經(jīng)現(xiàn)代研究證明可以調(diào)整臟腑機能，促進新陳代謝，增強免疫功能，調(diào)節(jié)人體的循環(huán)、呼吸、消化及神經(jīng)內(nèi)分泌等系統(tǒng)功能的作用，尤其在治療慢性病、疑難病及預防保健方面具有顯著優(yōu)勢。以往的研究較多的關(guān)注艾灸對臨床疾病的治療效果，對疾病的艾灸治療機制的研究尚不十分清楚。近來，研究者們更多的將研究的重點轉(zhuǎn)向艾灸自身的作用特性，在艾灸的生物物理特性方面獲得了更多的認識。但是艾

2、灸的刺激特點與治療效應之間聯(lián)系的研究還不夠深入，揭示艾灸起效相關(guān)機制的研究也不夠明確。溫熱刺激是艾灸的刺激特點，通調(diào)血脈是艾灸重要的治療效應，皮膚是艾灸直接的作用對象。新近的神經(jīng)生物學研究表明皮膚上分布多種溫度感受器，具有多種神經(jīng)內(nèi)分泌功能，皮膚的這些生物學功能，尤其是溫度感受器TRP家族中瞬時受體電位通道香草醛亞型1(TRPV1)可能與艾灸以溫促通效應的啟動機制相關(guān)。TRPV1可被＞43℃的熱刺激所激活，這個溫度的熱刺激處于臨床上艾條

3、灸熱刺激下施灸局部皮膚溫度的范圍之中。本研究嘗試對艾灸溫熱刺激的效應與TRPV1的激活之間的相關(guān)性進行探索性研究，以期發(fā)現(xiàn)艾灸以溫促通效應的可能啟動機制。
　　 方法：整個研究由理論研究和實驗研究兩部分組成。
　　 以理論研究為基礎(chǔ)，進行三方面的研究。1、對清代以前古籍記載的古代醫(yī)家對艾灸溫熱刺激的作用特點、艾灸通調(diào)血脈的治療效應以及皮、絡、脈的認識進行全面的梳理；2、對現(xiàn)代艾灸臨床與實驗研究的文獻中，有關(guān)溫熱刺激的特點

4、、通調(diào)氣血的作用和施灸局部的反應等艾灸溫通效應的研究進展進行總結(jié)；3、將現(xiàn)代神經(jīng)生物學近來研究的新認識對艾灸刺激特點與治療效應間的的啟示相聯(lián)系，分析艾灸以溫促通效應的可能機制。以實驗研究為主體，在理論研究的基礎(chǔ)上，進行三方面的實驗研究。1、采用成熟的電生理方法，通過多道生理信號采集儀監(jiān)測數(shù)據(jù)，比較不同溫度(38℃、46℃)的艾條灸熱刺激對心動過緩模型大鼠心功能、血流循環(huán)的影響；2、通過運用較為先進的小動物活體成像技術(shù)，觀察不同溫度(38

5、℃、46℃)的艾條灸熱刺激對野生型小鼠心得安體內(nèi)代謝分布的影響，比較分析其中的差異；3、通過組織形態(tài)學方法觀察，比較不同溫度(38℃、46℃)的艾條灸熱刺激對野生型正常小鼠與TRPV1-/-小鼠神闕穴施灸局部皮膚形態(tài)和功能的影響。利用HE染色法觀察艾灸溫熱刺激對神闕穴局部皮膚組織結(jié)構(gòu)的變化、利用甲苯胺藍染色法觀察艾灸溫熱刺激對神闕穴局部肥大細胞數(shù)目和形態(tài)的影響、利用免疫組化法觀察艾灸溫熱刺激對神闕穴局部CGRP、SP、VIP等神經(jīng)肽表達

6、的差異，并在此基礎(chǔ)上，進一步分析溫熱刺激、施灸局部變化以及TRPV1之間的關(guān)系，探討艾灸以溫促通效應的啟動機制。
　　 結(jié)果：
　　 理論研究：
　　 1、古代醫(yī)家對火、熱作為艾灸的刺激特點，通調(diào)血脈是艾灸重要的治療效應以及皮、絡、脈的特點積累了豐富的認識；
　　 2、現(xiàn)代研究者對艾灸刺激中的溫度差異，艾灸治療中行氣活血的作用以及施灸局部效應與艾灸的作用機理等方面進行了大量的研究；
　　 3、現(xiàn)代

7、神經(jīng)生物學的新認識提供了從皮膚生物學功能研究艾灸以溫促通效應啟動機制的知識基礎(chǔ)。
　　 實驗研究：
　　 1、不同溫度(38℃、46℃)的艾條灸熱刺激對心動過緩模型大鼠的HR、MAP、LVSP、+dp/dtmax、t-dp/dtmax均有改善作用；
　　 2、46℃艾條灸熱剌激對心動過緩大鼠HR、MAP、LVSP、+dp/dtmax、t-dp/dtmax的影響較38℃艾條灸熱刺激變化率差異統(tǒng)計學有極顯著意義（P＜

8、0.01）；
　　 3、不同溫度(38℃、46℃)的艾條灸熱刺激對小鼠心得安體內(nèi)代謝分布均有影響；
　　 4、46℃艾條灸熱刺激對小鼠心得安體內(nèi)代謝的影響較38℃艾條灸熱刺激加快；
　　 5、野生型小鼠與TRPV1-/-小鼠神闕穴局部皮膚形態(tài)結(jié)構(gòu)存在差異；
　　 6、不同溫度的艾條灸熱刺激及藥物刺激不同程度的改變了小鼠神闕穴局部皮膚的形態(tài)結(jié)構(gòu),46℃艾條灸熱刺激對小鼠施灸局部神闕穴皮膚組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變最

9、大；
　　 7、不同溫度的艾條灸熱刺激及藥物刺激不同程度的改變了小鼠神闕穴局部肥大細胞數(shù)目和形態(tài)，與其它各組干預比較,46℃艾條灸熱刺激使小鼠施灸局部神闕穴肥大細胞數(shù)目大量增多，并發(fā)生明顯的肥大細胞脫顆?，F(xiàn)象；
　　 8、46℃艾條灸熱刺激影響了小鼠施灸局部皮膚組織CGRP、SP、VIP等神經(jīng)肽的表達。
　　 結(jié)論：
　　 理論研究：
　　 1、火、熱，是艾灸的刺激特點，艾灸刺激中適宜的溫度差異是

10、艾灸以溫促通作用的前提；
　　 2、行氣活血、通調(diào)血脈，是艾灸重要的作用效應；
　　 3、施灸局部是艾灸直接的作用部位，皮、絡的特點是艾灸作用起效的基礎(chǔ)；
　　 4、施灸局部的效應與艾灸的作用機理相關(guān)；
　　 5、皮膚的生物學功能是艾灸以溫促通效應啟動機制的科學基礎(chǔ)。
　　 實驗研究：
　　 1、利用艾灸溫熱刺激的特點,46℃（可激活TRPV1）的溫熱刺激與38℃的溫熱刺激改善心功能的效應

11、存在差異；
　　 2、通調(diào)血脈是艾灸以溫促通的主要治療效應,46℃（可激活TRPV1）與38℃這2種不同溫度的艾灸熱刺激產(chǎn)生通調(diào)血脈的效應存在差異；
　　 3、施灸局部是艾灸直接的作用部位,46℃（可激活TRPV1）與38℃這2種不同溫度的艾灸熱刺激對施灸局部產(chǎn)生的效應影響不同；
　　 4、不同溫度的艾灸熱刺激對局部產(chǎn)生的效應與整體功能的調(diào)節(jié)相聯(lián)系；
　　 5、施灸局部皮膚的形態(tài)結(jié)構(gòu)差異，肥大細胞數(shù)目、形