沉默SIRT6對(duì)心臟成纖維細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：心臟衰竭已成為心血管疾病的主要死因。隨著生活水平的提高，環(huán)境改變及抗生素濫用，心臟衰竭發(fā)病率不斷上升，疾病負(fù)擔(dān)不斷增加，治療費(fèi)用不斷攀升，已成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。心臟衰竭是多種心臟疾病的最終歸宿。心肌衰竭的機(jī)制是心肌重塑，心肌纖維化是其中重要因素之一，而心臟成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞是心肌重塑的初始事件。目前仍缺少客觀有效的心臟衰竭的檢測指標(biāo)，因此尋找可靠的心臟衰竭的分子標(biāo)記物迫在眉睫。本研究重點(diǎn)探討SIRT6在心臟成纖維細(xì)胞

2、表型轉(zhuǎn)化中的潛在作用及其作用機(jī)制，探索其作為心肌纖維化及心臟衰竭分子標(biāo)志物的可能性，為在人群中心肌纖維化及心臟衰竭的預(yù)防提供新的思路。
　　方法：本研究以體外培養(yǎng)的原代SD大鼠心臟成纖維細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，在Ang-Ⅱ誘導(dǎo)的（心肌成纖維細(xì)胞）CFs纖維化模型使用RT-PCR檢測Sirtuins家族各成員mRNA表達(dá)變化。并進(jìn)一步使用Western-blot技術(shù)檢測SIRT6在不同濃度和不同作用時(shí)間Ang-Ⅱ的作用下的蛋白表達(dá)變化。沉

3、默SIRT6后，分別使用RT-PCR、Western-blot和免疫熒光檢測CFs表型轉(zhuǎn)化指標(biāo)α-SMA、paxillin、vinculin表達(dá)變化。為確認(rèn)SIRT6調(diào)節(jié)CFs表型轉(zhuǎn)化時(shí)候是通過NF-κB，我們使用NF-κB特異性抑制劑逆轉(zhuǎn)了沉默SIRT6升高肌成纖維細(xì)胞（MyoFbs）分子標(biāo)志的表達(dá)。
　　結(jié)果：在Ang-Ⅱ誘導(dǎo)的CFs纖維化模型使用RT-PCR檢測Sirtuins家族各成員mRNA表達(dá)變化。研究發(fā)現(xiàn)SIRT1和