槲皮素及其衍生物在Caco-2細(xì)胞模型上的吸收機(jī)制的研究.pdf

1、黃酮類化合物，是指天然生成的具有α或β苯基苯稠吡喃酮的一類物質(zhì)，廣泛存在于多種中草藥、水果和蔬菜等植物性或植源性食物中，并呈現(xiàn)出巨大的結(jié)構(gòu)與生理功能的多樣性。槲皮素（quercetin），3,3',4',5,7-五羥基黃酮，是膳食中最常見的類黃酮之一，廣泛存在于水果和蔬菜中，在機(jī)體內(nèi)能發(fā)揮有益的健康保護(hù)作用。這種保護(hù)作用包括抗氧化、抗炎癥、血管舒張，抗腫瘤等。但由于槲皮素的分子結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)極性羥基基團(tuán)，親脂性較弱，并且由于其分子結(jié)構(gòu)中

2、的羥基結(jié)構(gòu)造成的分子間作用，形成氫鍵，造成晶格能較高，其水溶性也較弱，在水中的溶解度只有7 ug/mL。槲皮素進(jìn)入體內(nèi)后，吸收并代謝，以甲基化、硫酸化和葡萄糖醛酸化的簡(jiǎn)單代謝為主，存在強(qiáng)烈的首過效應(yīng)，生物利用度低，一直以來在臨床上作為藥物而使用有很大的局限性。
　　以具有抗癌，抗氧化的黃酮類化合物槲皮素為先導(dǎo)化合物，根據(jù)羥基的化學(xué)性質(zhì)差異，對(duì)其進(jìn)行烷基化修飾，合成高產(chǎn)量、抗氧化效果強(qiáng)的3,7,3',4'-O-四乙酸乙酯槲皮素，提高

3、目標(biāo)化合物的脂溶性，阻斷其在體內(nèi)消化過程中的首過效應(yīng)，從而提高其生物利用度。采用硅膠柱層析法以及制備型液相色譜法對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行純化分離，并采用IR，MS，13C NMR進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定與表征。
　　采用化學(xué)方法比較槲皮素及3,7,3',4'-O-四乙酸乙酯槲皮素的理化性質(zhì)，并驗(yàn)證其是否提高藥物脂溶性。采用搖瓶-液相色譜法測(cè)試藥物在不同介質(zhì)中的溶解度及油水分配系數(shù)，初步探討衍生物脂溶性的變化。
　　通過建立Caco-2細(xì)胞模型來評(píng)價(jià)槲

4、皮素及3,7,3',4'-O-四乙酸乙酯槲皮素在不同藥物濃度、作用時(shí)間、pH值、溫度和乙二醇四乙酸(EGTA)作用下對(duì)腸道吸收轉(zhuǎn)運(yùn)的影響，并采用P-gp、MRP2轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑verapamil、MK571研究其轉(zhuǎn)運(yùn)過程中的主要轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，以綜合評(píng)價(jià)槲皮素及3,7,3',4'-O-四乙酸乙酯槲皮素的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。
　　主要結(jié)果如下：
　　1.采用高效液相色譜法測(cè)定槲皮素及3,7,3',4'-O-四乙酸乙酯槲皮素在水、不同緩沖鹽

5、溶液中的質(zhì)量濃度，測(cè)得37℃時(shí)，槲皮素在水中的平衡溶解度大于3,7,3',4'-O-四乙酸乙酯槲皮素在水中的平衡溶解度。采用搖瓶-液相色譜法，測(cè)定二者在正辛醇-水、緩沖液體系中的油水分配系數(shù)，測(cè)得結(jié)果表明，酯化修飾后的3,7,3',4'-O-四乙酸乙酯槲皮素脂溶性高于槲皮素。
　　2.以Caco-2單層細(xì)胞為模型，通過LC/MS方法定量檢測(cè)，評(píng)價(jià)槲皮素和3,7,3',4'-O-四乙酸乙酯槲皮素在跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)中的吸收及其轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。結(jié)果表