基于蛋白聚糖結(jié)構(gòu)信息的常見婦科腫瘤診斷方法研究.pdf

1、糖基化是最普遍的蛋白質(zhì)翻譯后修飾形式之一,在細胞表面和體液中蛋白質(zhì)糖基化的改變是與癌癥或其他疾病狀態(tài)的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)的。目前,臨床上所使用的針對乳腺癌、宮頸癌、卵巢癌等常見婦科惡性腫瘤疾病的血清學標志物主要有CEA、CA125、CA153等,但在對這些腫瘤標志物的實際臨床檢測當中,發(fā)現(xiàn)基于這些標志物蛋白表達水平所呈現(xiàn)出的腫瘤陽性檢出率以及特異性并不理想,用于腫瘤診斷的價值有限。尋找新的腫瘤標志物或腫瘤診斷模式是腫瘤領(lǐng)域的研究熱點,研

2、究表明不同的疾病會導致血清蛋白糖基化方式的改變,這些改變有可能為臨床診斷提供新的依據(jù)。
　　在本研究中,發(fā)展建立了基于抗體芯片捕獲血清樣本中的CA153、CA125、CEA等天然標志蛋白,然后再用可特異識別巖藻糖、唾液酸、甘露糖、N-乙酰半乳糖胺和N-乙酰葡萄糖胺等5種常見聚糖結(jié)構(gòu)類型的15種凝集素(AAL、LCA、MALⅡ、SNA、ConA、WGA、DBA、SBA、PNA、VVL、DSL、SJA、UEAⅠ、GSLⅡ、LEL)分別

3、進行檢測的標志蛋白自身聚糖結(jié)構(gòu)分析策略。共完成了對49例健康對照組樣本、31例乳腺癌組樣本、24例宮頸癌組樣本和19例卵巢癌組樣本中的CA153、CA125、CEA三種常見腫瘤標志蛋白的表達水平以及這些標志蛋白自身聚糖水平的測定。對實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學分析結(jié)果顯示:相比于健康對照組樣本中標志蛋白的表達水平,CA153和CA125在乳腺癌樣本組中的表達水平呈下降趨勢,CEA在宮頸癌樣本組中的表達水平呈下降趨勢,CA153、CA125和CEA在

4、卵巢癌樣本組中的表達水平無統(tǒng)計學意義上的差異變化。這一結(jié)果表明基于CA153、CA125、CEA這三個標志蛋白表達水平的檢測,對于乳腺癌、宮頸癌、卵巢癌的診斷價值不大。通過對血清中這些標志蛋白的聚糖水平以及聚糖水平/蛋白水平比值的比較分析,發(fā)現(xiàn)與健康對照組樣本相比,CA153蛋白上的巖藻糖類型結(jié)構(gòu)、CEA蛋白上的唾液酸以及N-乙酰半乳糖胺等類型結(jié)構(gòu)的含量在乳腺癌樣本組中顯著增多;CEA蛋白上的唾液酸類型糖結(jié)構(gòu)的含量在宮頸癌樣本組中顯著增

5、多;CA153蛋白上的唾液酸類型糖結(jié)構(gòu)的含量在卵巢癌樣本組中顯著增多。而且以這些標志蛋白自身聚糖信息變化作為腫瘤診斷指標有著更好的診斷靈敏度與特異性。
　　由于血清樣本中含有豐富的糖蛋白,這些蛋白聚糖結(jié)構(gòu)信息的變化可能與腫瘤疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。本研究制備了包含15種凝集素的凝集素芯片,通過對標記的臨床血清樣本檢測,獲得所收集的全部123例樣本的血清蛋白聚糖結(jié)構(gòu)信息指紋譜。通過逐步判別分析篩選出能達到最佳樣本分組判別的凝集素指

6、標并建立相應(yīng)的判別函數(shù)方程,結(jié)果對健康對照樣本和腫瘤組(乳腺癌、宮頸癌、卵巢癌)樣本進行回顧性診斷的總正確率為84.6％;針對腫瘤樣本組也建立了用于區(qū)分乳腺癌、宮頸癌和卵巢癌的判別函數(shù)方程,結(jié)果對三種腫瘤樣本進行回顧性診斷的總正確率為85.1%。
　　本研究工作表明,無論是利用血清中特定蛋白的自身聚糖水平/或結(jié)構(gòu)的變化,還是利用血清樣本中蛋白聚糖結(jié)構(gòu)信息譜的變化,都能夠獲得較好的婦科腫瘤診斷結(jié)果,可為常見婦科腫瘤臨床診斷提供一種新