大鼠對(duì)比劑腎病發(fā)病機(jī)制的研究.pdf

1、目的:
　　 本研究旨在通過(guò)成功建立對(duì)比劑腎?。–ontrast induced nephropathy, CIN）大鼠模型，觀察大鼠腎臟病理改變及血清肌酐(Scr)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)和腎組織中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET-1)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)及細(xì)胞凋亡指標(biāo)(Bcl-2、Bax)表達(dá)水平的變化，探討C

2、IN的發(fā)病機(jī)制。
　　 研究方法:
　　 1、建立CIN大鼠模型:將30只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分成2組:實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組各15只。適應(yīng)性喂養(yǎng)7d。實(shí)驗(yàn)第1天2組大鼠分別予戊巴比妥腹腔注射麻醉后，剝離股靜脈。分別取血2ml后，實(shí)驗(yàn)組給予泛影葡胺10mg/kg股靜脈注射，對(duì)照組給予生理鹽水10mg/kg股靜脈注射。術(shù)后第48h、72h分別由內(nèi)眥靜脈取血2ml，72h取血后處死大鼠，取雙腎，分離皮質(zhì)、髓質(zhì)。實(shí)驗(yàn)組注射對(duì)

3、比劑后48-72h Scr較原有基礎(chǔ)水平升高25％以上提示CIN模型建立成功。
　　 2、標(biāo)本處理:3次留取的血標(biāo)本均予離心后測(cè)定血清Scr、IL-6、hs-CRP、TNF-α含量變化。左腎皮質(zhì)保存于-80℃冰箱，以測(cè)定腎組織中MDA、SOD、NO、ET-1、VEGF及Bcl-2、Bax的表達(dá)水平。右腎皮質(zhì)大部分石蠟包埋行HE染色及免疫組化染色;小部分制成1 mm3浸泡于戊二醛磷酸緩沖液中用于電鏡標(biāo)本。
　　 結(jié)果:

4、r>　　 1、血清學(xué)指標(biāo):(1)2組大鼠術(shù)前血清中Scr、IL-6、hs-CRP、TNF-α含量無(wú)明顯差異(P＞0.05);(2)術(shù)后48h血清中Scr、IL-6、hs-CRP含量實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);(3)術(shù)后72h血清中Scr、hs-CRP含量實(shí)驗(yàn)組仍高于對(duì)照組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2、腎組織指標(biāo):術(shù)后72h腎組織中(1) MDA、ET-1、Bax含量實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組

5、，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);(2) Bcl-2含量實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);(3) VEGF在實(shí)驗(yàn)組高表達(dá)者為80％，對(duì)照組為26.67％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3、組織學(xué)變化:(1)光鏡顯示:實(shí)驗(yàn)組:①腎小管上皮細(xì)胞空泡樣變、胞質(zhì)變性，小管結(jié)構(gòu)甚至消失，且可見細(xì)胞核固縮、裂解;②腎小管、腎間質(zhì)可見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);③腎小管管腔內(nèi)可見蛋白等管型，管腔甚至閉塞;④腎小動(dòng)脈擴(kuò)張、淤血

6、;⑤腎小球結(jié)構(gòu)未見明顯異常。對(duì)照組腎小管及腎小球基本正常。(2)電鏡顯示:實(shí)驗(yàn)組:①腎小管基底膜重度增厚，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹，內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)線粒體嚴(yán)重腫脹，嵴排列紊亂，甚至消失;②管腔面的微絨毛大量脫落。對(duì)照組腎小管及腎小球超微結(jié)構(gòu)基本正常。
　　 結(jié)論:
　　 1、本研究通過(guò)注射泛影葡胺成功建立CIN大鼠模型，結(jié)果穩(wěn)定、可重復(fù)性高。
　　 2、CIN的發(fā)病機(jī)制可能與氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、腎臟血管舒縮不穩(wěn)定、凋亡以及直接腎毒性