新型雌激素受體GPR30在子宮內(nèi)膜癌中的表達及其臨床意義的研究.pdf

1、目的：子宮內(nèi)膜癌是女性三大惡性腫瘤之一，近年來發(fā)病率有上升趨勢。多年研究證實其發(fā)生與長期持續(xù)的雌激素刺激有關，雌激素與傳統(tǒng)的雌激素核受體鞏結合，啟動相關基因的轉(zhuǎn)錄，發(fā)揮其生物學作用。但最近發(fā)現(xiàn)在阻斷經(jīng)典的雌激素核受體FRα后仍然存在著快速的信號轉(zhuǎn)導和基因激活，由此推測阻斷核受體ERα并不能使雌激素受體封閉完全。最新發(fā)現(xiàn)的新型雌激素受體GPR30，可通過更快的非基因組細胞信號轉(zhuǎn)錄途徑對雌激素發(fā)生反應。本實驗通過檢測正常子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌

2、組織中GPR30 mRNA、EGFR mRNA、ERα mRNA和c-fos mRNA的基因表達情況；研究子宮內(nèi)膜癌中GPR30 mRNA、EGFR mRNA的表達與患者的臨床分期、肌層浸潤、組織類型的關系；探討新型雌激素受體GPR30和經(jīng)典的雌激素受體ERα介導子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的途徑，從而在基因水平對子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生做較深入的研究，揭示Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的一個重要機制，為臨床治療子宮內(nèi)膜癌并監(jiān)測其預后提供新的理論依據(jù)和思路方法。

3、　　 方法：
　　 研究對象：選擇2007年9月至2008年11月期間在河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院婦科和計劃生育病房術前診刮確診為子宮內(nèi)膜癌的住院病人20例，取全切后的子宮內(nèi)膜癌組織，旁組織送病理回報為子宮內(nèi)膜癌。同期在宮腔鏡室選擇因子宮縱隔、子宮斜隔行宮腔鏡診療的正常子宮內(nèi)膜組織10例，旁組織病理回報為正常內(nèi)膜。子宮內(nèi)膜癌病人按照1988年FIGO臨床一手術學分期分別納入標準。所有對象采集標本前三個月均無激素類藥物應用史，未進行過

4、放療或化療，未合并其他婦產(chǎn)科和內(nèi)科疾病。子宮內(nèi)膜癌FIGO分期和子宮縱隔、子宮斜隔的診斷標準參照樂杰等主編的第六版《婦產(chǎn)科學》。
　　 取材：采用3點取材法，取子宮全切后的子宮內(nèi)膜癌組織和因縱隔、斜隔子宮行宮腔鏡診療的正常子宮內(nèi)膜組織，每份各取3塊，1×1cm大小，旁組織送病理。標本用DEPC水漂洗干凈去除血液，從活體取下的標本必須在20分鐘內(nèi)放入液氮中，最終轉(zhuǎn)運至-80℃冰箱保存。
　　 實驗方法：采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反

5、應半定量技術（RT-PCR）檢測正常子宮內(nèi)膜組織和子宮內(nèi)膜癌組織中的GPR30 mRNA、ER，mRNA、EGFR mRNA和c-fos mRNA的表達，所得灰度值IOD數(shù)據(jù)應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析，各項測定值以均數(shù)±標準差（x±s）表示，各因子的數(shù)據(jù)資料符合正態(tài)分布，進行方差齊性檢驗，可以采用兩組間均數(shù)比較的兩樣本t檢驗或近似t檢驗。統(tǒng)計各子宮內(nèi)膜癌標本的FIGO分期、肌層浸潤和組織類型與GPR30 mRNA、EGFR m

6、RNA的關系并分別進行t檢驗，因子間進行直線相關分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 1.子宮內(nèi)膜癌組織和正常子宮內(nèi)膜組織中均擴增到GPR30、ERα、EGFR的預期目的基因片段，在正常子宮內(nèi)膜中未擴增到c-fos的目的片段；且在子宮內(nèi)膜癌組織中GPR30、EGFR、c-fos的相對灰度IOD值明顯高于正常子宮內(nèi)膜組織，有顯著性差異（P<0.05）；ERα的相對灰度IOD值在正常子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜

7、癌組織中沒有顯著性差異（P>0.05）。2癌組織肌層浸潤大于等于1/2肌層的子宮內(nèi)膜癌組織（7例）中GPR30的相對灰度IOD值明顯高于肌層浸潤小于1/
　　 2.或沒有侵犯肌層的組織（13例），且有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；FIGO臨床分期Ⅲ、Ⅳ期患者（9例）組織中GPR30、EGFR的相對灰度IOD值明顯高于FIGO臨床分期Ⅰ、Ⅱ患者（11例），且有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；特殊類型的子宮內(nèi)膜癌（包括子宮乳頭狀漿液性腺癌

8、2例、透明細胞癌2例，未分化癌1例）組織中GPR30的相對灰度IOD值不但高于正常子宮內(nèi)膜組織，而且高于子宮內(nèi)膜腺癌組織中GPR30的相對灰度IOD值，且均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　 3.子宮內(nèi)膜癌組織中GPR30 mRNA的表達與EGFR mRNA的表達呈正相關（r=0.507，P<0.05）；GPR30 mRNA的表達和ERα mRNA無關（P>0.05）；EGFR mRNA的表達和ERαmRNA的表達無關（P>

9、0.05）。
　　 結論：
　　 1.子宮內(nèi)膜癌患者組織中GPR30 mRNA、EGFR mRNA和C-fos mRNA的表達明顯高于正常子宮內(nèi)膜，且GPR30mRNA和EGFR mRNA的表達具有正相關性。提示新型雌激素受體GPR30在可能在EGFR的協(xié)助下，誘導激活原癌基因c-fos，參與了子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生。此過程可能與特殊類型子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生有關。
　　 2.新型雌激素受體GPR30的表達高低與子宮內(nèi)膜癌的