靶向HPV18E6基因siRNA對Hela細(xì)胞p21、VEGF、Bax和Bcl-2基因的影響.pdf

1、目的：研究針對人乳頭瘤病毒18型E6基因的特異性小干擾RNA(siRNA)對人宮頸癌細(xì)胞增殖相關(guān)基因p21、VEGF、Bax和Bcl-2的影響。 方法：利用特異性siRNA脂質(zhì)體法瞬時轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞，采用半定量RT-PCR檢測Hela細(xì)胞中p21、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、Bax和Bcl-2mRNA的變化，采用免疫組化的方法檢測Hela細(xì)胞中p21和VEGF蛋白的變化。 結(jié)果：RT-PCR檢測結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染前p21

2、mRNA的表達水平為0.86±0.02，轉(zhuǎn)染后24、48、72h，其表達水平分別為1.06±0.02、1.66±0.03、1.24±0.01;轉(zhuǎn)染前VEGFmRNA的表達水平為1.62±0.03，轉(zhuǎn)染后24、48、72h，其表達水平分別為1.47±0.06、1.31±0.03、1.35±0.13；轉(zhuǎn)染前BaxmRNA的表達水平為0.94±0.02，轉(zhuǎn)染后24、48、72h，其表達水平分別為1.46±0.03、2.42±0.03、1.37

3、±0.04；轉(zhuǎn)染前Bcl-2mRNA的表達水平為1.57±0.04，轉(zhuǎn)染后24、48、72h，其表達水平分別為1.23±0.02、1.10±0.02、0.89±0.02；轉(zhuǎn)染后各時間點p21，VEGF,Bax和Bcl-2mRNA的表達水平分別與其轉(zhuǎn)染前比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。轉(zhuǎn)染后24、48、72hp21和BaxmRNA的表達與轉(zhuǎn)染前比較均有升高；轉(zhuǎn)染后24、48、72hVEGF和Bcl-2mRNA的表達與轉(zhuǎn)染前比較均

4、有降低。免疫組化檢測顯示轉(zhuǎn)染前p21蛋白的表達水平為0.26±0.02，轉(zhuǎn)染后48、72h，其表達水平分別為0.42±0.03、0.48±0.03；轉(zhuǎn)染前VEGF蛋白的表達水平為0.43±0.02，轉(zhuǎn)染后48、72h，其表達水平分別為0.36±0.02、0.32±0.03；轉(zhuǎn)染后各時間點p21，VEGF蛋白的表達水平分別與其轉(zhuǎn)染前比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論：HPV18E6siRNA可特異有效的干擾宮頸癌He