復(fù)心煎對心肌缺血再灌注損傷的保護作用及機制研究.pdf

1、近年來,缺血性心臟病治療后引起的心肌缺血再灌注損傷(MIRI)已成為臨床上亟待攻克的難題之一,研究開發(fā)切實有效的藥物成為研究熱點。復(fù)心煎系中醫(yī)臨床經(jīng)驗方劑,具有益氣活血之功效,近年來在缺血性心臟病的臨床治療中取得了滿意療效。但其保護機制尚不明確,本文通過整體動物和體外細胞生物學實驗,觀察復(fù)心煎對心肌缺血再灌注損傷的保護作用,并初步探索其作用機制,具體研究內(nèi)容如下:
　　 (1)采用結(jié)扎冠狀動脈法制備大鼠心肌缺血再灌注損傷模型,結(jié)

2、扎20min后再灌注120min。實驗大鼠隨機分為偽手術(shù)組、模型組、氟伐他汀組及復(fù)心煎高、低劑量組,記錄各組大鼠心電圖ST段變化,HE染色觀察大鼠心肌組織病理形態(tài)學變化,NBT染色測量大鼠心肌梗死范圍,并檢測大鼠血清LOH、AST、CK-MB活性。
　　 (2)按上述方法制備大鼠MIRI模型后,檢測各組大鼠血清中SOD、MDA、GSH—Px及NO的含量變化,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡,RT-PCR測定心肌組織iNOS mRNA

3、的表達。
　　 (3)對乳鼠心肌細胞進行原代培養(yǎng),通過MTT測定心肌細胞存活率,確定藥物安全作用范圍:采用Na2S2O4造成缺氧／復(fù)氧模型,分別給予相應(yīng)濃度的復(fù)心煎藥液進行預(yù)處理,觀察各給藥組的細胞形態(tài)變化和細胞存活率變化,并檢測細胞上清液中LDH和MDA水平。
　　 結(jié)果表明:(1)復(fù)心煎可明顯降低大鼠缺血再灌注后引起的ST段位移,改善心肌組織病理損害,降低血清中LDH、AST、CK-MB活性；與模型組相比,復(fù)心煎可一

4、定程度上縮小心肌梗死范圍,提示復(fù)心煎對大鼠心肌缺血再灌注損傷具有保護作用。
　　 (2)復(fù)心煎高劑量組血清中SOD和GSH-Px活性明顯升高,MDA含量降低,復(fù)心煎低劑量組與模型組相比無顯著性差異；復(fù)心煎高、低劑量組可明顯減少心肌細胞凋亡,抑制iNOS mRNA的表達,提示復(fù)心煎可通過多環(huán)節(jié)發(fā)揮對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用。
　　 (3)采用MTT法確定藥物安全濃度后,給予相應(yīng)濃度的藥液,發(fā)現(xiàn)復(fù)心煎可改善心肌細胞形