二妙丸類方抗?jié)駸嶙C痛風(fēng)物質(zhì)基礎(chǔ)相關(guān)性研究.pdf

1、為探索類方方劑配伍物質(zhì)基礎(chǔ)變化特征，研究二妙丸類方(二妙丸、三妙丸、四妙丸及加昧四妙丸)抗?jié)駸嶙C痛風(fēng)物質(zhì)基礎(chǔ)的關(guān)聯(lián)性，本文以二妙丸為基礎(chǔ)方，測(cè)定二妙丸類方抗?jié)駸嶙C痛風(fēng)有效部位群指紋圖譜，比較指紋圖譜共有峰成分特征及配伍變化；統(tǒng)計(jì)分析有效部位與藥效指標(biāo)的相關(guān)性；用相關(guān)、回歸、模糊聚類等統(tǒng)計(jì)方法對(duì)指紋圖譜共有峰與藥效結(jié)果進(jìn)行邏輯關(guān)聯(lián)分析，確定二妙丸類方效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)，探討分析二妙丸類方抗?jié)駸嶙C痛風(fēng)物質(zhì)基礎(chǔ)的相關(guān)性，探索中醫(yī)類方方劑效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)

2、及配伍規(guī)律的研究途徑。
　　 本論文主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　 首先，制備二妙丸類方與組方藥有效部位(生物堿、黃酮、揮發(fā)油、有機(jī)酸、苷、水液)群，并通過(guò)正交設(shè)計(jì)組合組方藥部位，制備大量樣本的供試品；建立加味四妙丸有效部位群指紋圖譜，并測(cè)定二妙丸類方及供試品的HPLC、GC的四個(gè)指紋圖譜，確定共有峰。
　　 其次，利用組方藥及其有效部位以及紫外光譜圖對(duì)比，確定指紋圖譜共有峰的成分特征、共有峰組方藥及有效部位的歸屬；通

3、過(guò)對(duì)照品對(duì)比以及HPLC-MS、GC-GC對(duì)指紋圖譜共有峰進(jìn)行定性分析，從而表征二妙丸類方的物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　 最后，采用多元回歸分析的強(qiáng)迫進(jìn)入法(enter)和逐步回歸法(stepwise)、相關(guān)分析計(jì)算pearson相關(guān)系數(shù)以及聚類分析的方法，將二妙丸類方有效部位群及組合有效部位樣品的藥效數(shù)據(jù)和指紋圖譜共有峰面積進(jìn)行了相關(guān)性統(tǒng)計(jì)分析，優(yōu)選對(duì)藥效有顯著影響的指紋圖譜共有峰；通過(guò)比較二妙丸類方的HPLC圖譜、揮發(fā)油GC圖譜以及水液

4、部位乙酰化GC圖譜，探討了配伍對(duì)二妙丸類方的成分及效應(yīng)的影響。采用模糊聚類的統(tǒng)計(jì)分析方法對(duì)二妙丸類方的指紋圖譜中有效色譜峰成分及藥效進(jìn)行聚類分析，探討二妙丸類方抗?jié)駸嶙C痛風(fēng)效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)的關(guān)聯(lián)性。
　　 結(jié)合藥效數(shù)據(jù)，通過(guò)方差分析、多元回歸和相關(guān)分析以及模糊聚類等統(tǒng)計(jì)方法，篩選出了對(duì)藥效有顯著影響的有效部位、共有峰等并確定了類方間的相關(guān)性，嘗試了一種復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)研究的模式。通過(guò)有效部位群的指紋圖譜與抗炎、鎮(zhèn)痛、降尿酸以及對(duì)HUVE

5、C(尿酸鹽誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞)損傷的保護(hù)作用等藥效相關(guān)性研究，得出生物堿、苷、水液部位在抗炎、鎮(zhèn)痛、降尿酸上都有明顯的作用，揮發(fā)油在抗炎和HUvEC增長(zhǎng)抑制率上作用明顯，有機(jī)酸、黃酮部位對(duì)藥效有一定的提高作用，已鑒定出的主要成分是異綠原酸a，b，丁香酸，2-(8-甲基-2，8-二羥基-2-羥甲基雙環(huán)[5.3.0]葵-7-基)-異丙醇葡萄糖苷，斷馬錢子苷二甲基縮醛，木犀草苷、綠原酸異構(gòu)體、阿魏酸、綠原酸、木蘭花堿、紫堇定，東莨菪堿、蝙蝠葛

6、任堿，茵芋堿，(2R，3R)-花旗松素-3’-O-β-D-吡喃鼠李糖苷、紫丁香苷、鹽酸藥根堿、落新婦苷、新落新婦苷、巴馬汀、小檗堿、異落新婦苷、新異落新婦苷、2-(1，4α-二甲基-2，3-二羥基-十氫萊-7-基)-異丙醇葡萄糖苷，馬錢子苷，竹節(jié)人參皂昔I，IV、7-苯基-2-庚烯-4，6-二炔-1-醇、β-芹子烯、β-桉葉油醇、蒼術(shù)醇、α-甜沒(méi)藥萜醇、4，11-桉葉二烯、γ-桉葉油醇、β-倍半水芹烯、1，4-二甲基-3-(2-甲基-1

7、-烯丙基)-4-乙烯基-1-環(huán)辛烯、欖香醇、γ-欖香烯、3-蒈烯等。由黃柏和蒼術(shù)組成的二妙丸的物質(zhì)基礎(chǔ)由生物堿、揮發(fā)油、苷類以及水液部位(糖類成分)組成，對(duì)抗炎、鎮(zhèn)痛、降尿酸、HUVEC增長(zhǎng)抑制率都有明顯的作用；隨著主要含有苷成分的牛膝加入，三妙丸在藥效方面要優(yōu)于二妙丸；隨著薏苡仁的加入，四妙丸在抗炎和HUVEC損傷的保護(hù)方面要優(yōu)于三妙丸；而土茯苓和忍冬藤的加入使加味四妙丸的藥效有著明顯的增加。說(shuō)明在基礎(chǔ)方二妙丸基礎(chǔ)上加減形成的類方物質(zhì)