大鼠嗅鞘細胞的純化及活性檢測.pdf

1、目的：1.采用改良差速貼壁聯合胰酶限時消化法純化大鼠嗅鞘細胞并檢測嗅鞘細胞純度。2.檢測上述純化方法所得嗅鞘細胞的生物活性。
　　方法：分離新生7d的SD大鼠嗅球嗅鞘細胞，分組后采用改良差速貼壁法聯合不同時段（1min﹑3min﹑5min）胰酶消化法純化培養(yǎng)，觀察不同時段純化的嗅鞘細胞的形態(tài)特點及生長情況；應用免疫熒光法檢測細胞膜受體NGFRP75并評估細胞純度；應用CCK-8法和酶聯免疫吸附法分別檢測嗅鞘細胞在純化后3d-15d

2、的增殖活性和分泌腦源性神經營養(yǎng)因子的含量。
　　結果：改良差速貼壁聯合胰酶限時消化1min﹑3min﹑5min法所得嗅鞘細胞純度分別為（57.52±2.13）％、（78.95±2.60）%、（49.01±0.74）%，組間兩兩比較有統計學意義（P＜0.05）；改良差速貼壁法聯合胰酶限時消化1min﹑3min﹑5min法所得嗅鞘細胞在純化后7d﹑9d﹑11d時的細胞數目和腦源性神經營養(yǎng)因子分泌量顯示3min組最優(yōu)，組間比較有統計學意