白藜蘆醇抑制MIF-ERK信號(hào)通路干預(yù)復(fù)雜性區(qū)域疼痛綜合征1型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)研究旨在探討MIF/ERK信號(hào)通路在復(fù)雜性區(qū)域疼痛綜合征1型（complex regional pain syndrome type1，CRPS1）大鼠痛覺異常中的作用及白藜蘆醇（resveratrol，Res）在治療CRPS1型大鼠中的信號(hào)通路分子機(jī)制。
　　方法：⑴隨機(jī)選取成年雄性SD大鼠30只。按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為3組：正常對(duì)照組、假手術(shù)組、缺血模型組每組各10只。各組均于造模后第1小時(shí)、8小時(shí)、24小時(shí)、48

2、小時(shí)、3天、4天、7天及14天時(shí)進(jìn)行疼痛行為的測(cè)定；造模后第8小時(shí)、7天及14天取尾靜脈血液進(jìn)行ELISA檢測(cè)血清中MIF、TNF-α的濃度；Western blotting檢測(cè)各組坐骨神經(jīng)中MIF、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的表達(dá)。⑵隨機(jī)選取成年雄性SD大鼠50只。隨機(jī)分為正常對(duì)照組（A組，n=10），假手術(shù)組（B組，n=10），缺血模型組（C組，n=10），ISO-1治療組（D組，n=10），白藜蘆醇治療組（E組，n=10）

3、。A、B、C組3組大鼠均每天每只給予腹腔注射5％DMSO10μl，D組給予腹腔注射MIF抑制劑ISO-1以1mg/（kg.d）溶于5%DMSO10μl的溶液，E組給予腹腔注射白藜蘆醇以20mg/（kg·d）溶解于5%DMSO10μl的溶液，均連續(xù)治療14天。各組均在治療第0天、治療后第7天及第14天進(jìn)行機(jī)械觸誘發(fā)痛行為的檢測(cè)，以及ELISA檢測(cè)血清中MIF、TNF-α的濃度；治療后第14天用Western blotting檢測(cè)各組坐骨神

4、經(jīng)中MIF、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：①在造模成功后第1小時(shí)、8小時(shí)及24小時(shí)，缺血模型組出現(xiàn)自發(fā)痛行為和Q-tip陽(yáng)性反應(yīng)，而正常對(duì)照組和假手術(shù)組無自發(fā)痛和Q-tip陽(yáng)性反應(yīng)行為（P<0.05）。缺血模型組疼痛閾值均低于正常對(duì)照組與假手術(shù)組（P<0.05）。缺血模型組血清MIF的濃度均高于正常對(duì)照組和假手術(shù)組（P<0.05）。TNF-α的濃度在第8小時(shí)及第14天時(shí)高于正常對(duì)照組和假手術(shù)組（P<0.05

5、），14天后三組無明顯差異（P>0.05）。Western blotting顯示缺血模型組坐骨神經(jīng)的MIF、ERK1/2及ERK1/2磷酸化蛋白均有高表達(dá)。②治療第0天，C、D、E組的疼痛閾值與A、B組相比顯著下降（P<0.01）；治療第7天，D、E組疼痛閾值較C組有改善（P<0.05），但低于A組（P<0.05）；治療第14天，D、E組疼痛閾值與A組相比無明顯差異（P>0.05），顯著高于C組（P<0.01）。C組MIF的濃度均高于A

6、組（P<0.05）；治療第0天，D、E組MIF的濃度顯著高于A組（P<0.01）；治療第7天和第14天，D、E組MIF的濃度相比C組降低（P<0.05），與A組無明顯差異（P>0.05）。治療第0天，C、D、E組TNF-α的濃度顯著高于A、B組（P<0.01）；治療第7天，D、E組TNF-α的濃度相比C組降低（P<0.05），與A，B組無明顯差異（P>0.05）；治療第14天，A、B、C、D、E組TNF-α的濃度無明顯差異（P<0.05

7、）。治療第14天，D組與E組坐骨神經(jīng)中MIF及ERK1/2磷酸化程度相比C組顯著降低，與A、B組無明顯差異。
　　結(jié)論：⑴MIF及ERK1/2磷酸化水平的表達(dá)參與了CRPS1型大鼠疼痛病理的作用機(jī)制。⑵MIF抑制后，ERK1/2磷酸化水平相應(yīng)發(fā)生了抑制，MIF可能通過MAPK/ERK通路在CRPS1型痛覺異常中發(fā)揮作用。⑶白藜蘆醇有與ISO-1相似的作用，可以下調(diào)MIF和ERK1/2磷酸化水平的表達(dá)。⑷白藜蘆醇可能通過抑制MIF/