谷氨酰胺誘導熱休克蛋白在內(nèi)毒素休克血管低反應性中的作用及可能機制.pdf

1、第一章谷氨酰胺對正常大鼠熱休克蛋白70 mRNA表達的影響目的：觀察谷氨酰胺(Glutamine，Gln)是否能夠誘導熱休克蛋白70mRNA的表達。 方法：1)24只健康雄性SD大鼠隨機分為4組(每組n=6)，Ⅰ組，靜脈注射生理鹽水；Ⅱ組，靜脈注射Gln．0.15 g·kg<'-1>Ⅲ組，靜脈注射Gln．0.45 g·kg<'-1>：Ⅳ組，靜脈注射Gln.0.75g.kg<'-1>。各組大鼠于4h后處死，留取心、肝、肺和主動脈，

2、用RT-PCR法測定HSP70mRNA的表達。2)30只健康雄性SD大鼠靜脈注射Gln.0.75 g·kg<'-1>后隨機分為5組(每組n=6)，分別在1h(1h組)、6h(6h組)、12h(12h組)、24h(24h組)和48h(48h組)處死，留取心、肝、肺和主動脈，用RT-PCR法測定HSPTOmRNA的表達。 結(jié)果：1)各臟器組織中，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組HSP70mRNA的表達均高于I組(P<0.05)，Gln劑量依賴性導致HS

3、P70mRNA的表達增高(P<0.05)：2)1h組、6h組和12h組HSP70的mRNA表達均高于24h組和48h組(P<0.05)。 結(jié)論：Gln能夠時間和劑量依賴性誘導大鼠HSPTO的mRNA表達，并且1-12h為表達高峰期。 第二章谷氨酰胺誘導熱休克蛋白表達對內(nèi)毒素休克大鼠血管反應性的影響目的觀察注射谷氨酰胺(Glutamine，Gln)誘導熱休克蛋白(heat shock protein，HSP)表達對內(nèi)毒素休

4、克大鼠血管反應性的影響。 方法 24只健康雄性SD大鼠，隨機分成空白對照組(n=8)：LPS休克組(LPS[Sigma]10 mg·kg<'-1>iv，n=8)：谷氨酰胺(Gln)治療組(LPS注射前1h靜脈注射Gln 0.75 g·kg<'-1>，n=8)。空白對照組及注射LPS 6 h后各組動物靜注去氧腎上腺素(PE，0.5-2.5 μg·kg<'-1>)，記錄注藥后MAP的增加百分比。所有in vivo實驗結(jié)束后，取大鼠胸

5、主動脈環(huán)做離體張力實驗，建立PE的劑量一反應曲線并計算相應的Emax、EC<,50>值。注射LPS后在90 min、360 min測定血清TNF-α、I-6和血漿MDA含量。注射LPS后6 h，留取心臟和主動脈，用免疫組化法測HSP70的表達。結(jié)果：靜脈注射PE后，L,PS休克組動物MAP的平均增長率與對照組相比顯著降低至51.4﹪(P<0.05)：而Gln治療組MAP對PE反應的增長率較之LPS休克組增高了17.5﹪(P<0.05)。

6、LPS休克組大鼠胸主動脈環(huán)對PE的反應(Emax，0.94 g±0.01g；EC<,50>，13.49 nmol/L±0.06 nmol/L)與對照組相比有顯著差異(Emax，1.88 g±0.04 g：EC<,50>，8.55 nmol/L±0.08 nmol/L，P<0.05)，Gln治療組動脈血管的血管反應性有顯著改善(p<0.05)。三組動物的心臟、主動脈中均有HSP70的表達，但Gln組的表達量較L,PS休克組顯著增加(P<0