“肝脾”為核心干預(yù)高催乳激素血癥大鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡機(jī)制初探.pdf

1、目的:本研究通過十組模型組比較及逍遙散湯劑與顆粒劑比較，以制備成熟高催乳激素血癥大鼠模型及適宜藥物劑型，為探討“肝脾為核心靶向干預(yù)高催乳激素血癥模型動(dòng)物卵巢顆粒細(xì)胞凋亡機(jī)制”奠定基礎(chǔ)。同時(shí)，對(duì)高催乳激素血癥的作用機(jī)制及靶點(diǎn)提供新的理論依據(jù)，并提出一個(gè)新的治療方法和安全有效的方藥，為中醫(yī)藥對(duì)女性疑難病癥的治療提供一個(gè)科學(xué)的依據(jù)。
　　 方法:十種高催乳激素血癥動(dòng)物模型初篩:隨機(jī)分為正常空白組;胃復(fù)安1組;胃復(fù)安2組;胃復(fù)安3組;舒

2、必利針1組;舒必利針2組;乙烯雌酚針組;乙烯雌酚片組;氟哌啶醇組;垂體1組;垂體2組;除正常空白組外，并分別給予相應(yīng)造模處理。初篩后，再次五種HPRL動(dòng)物模型篩選。造模結(jié)束后將大鼠處死，取血及卵巢，采用放免法及酶聯(lián)免疫法測(cè)血清泌乳素水平及HE染色觀察卵巢組織形態(tài)學(xué)改變。
　　 加味逍遙散湯劑與顆粒劑比較:在成熟動(dòng)物模型成功制備后隨機(jī)分為正?？瞻捉M;陰性對(duì)照組;加味逍遙散中劑量顆粒組;加味逍遙散中劑量湯劑組;除正常空白組外，并分別

3、予以治療，治療結(jié)束后將大鼠處死，取血及卵巢，采用放免法及酶聯(lián)免疫法測(cè)血清泌乳素水平及HE染色觀察卵巢組織形態(tài)學(xué)改變。
　　 卵巢顆粒細(xì)胞凋亡機(jī)制研究:在成熟動(dòng)物模型成功制備及藥物制劑研究后隨機(jī)分為正常空白組;陰性對(duì)照組;加味逍遙散高、中、低劑量組;溴隱亭組;除正常空白組外，并分別予以治療，治療結(jié)束后將大鼠處死，取血及卵巢，采用放免法及酶聯(lián)免疫法測(cè)血清泌乳素水平，采用HE染色觀察卵巢卵泡形態(tài)學(xué)改變，通過免疫組化法檢測(cè)bax、bcl

4、-2表達(dá)差異觀察各組卵巢顆粒細(xì)胞凋亡情況。
　　 結(jié)果:十種HPRL動(dòng)物模型初篩及再次五種動(dòng)物模型篩選:與正?？瞻捉M血清催乳素比較，胃復(fù)安1組、2組、3組血清催乳素明顯升高(P＜0.01)，垂體1組、2組血清催乳素升高(P＜0.05)，余下各造模組血清催乳素均有升高趨勢(shì);與正?？瞻捉M卵泡發(fā)育情況比較，胃復(fù)安3組造模組各級(jí)卵泡總數(shù)明顯下降、閉鎖卵泡數(shù)明顯增加、閉鎖卵泡/總卵泡明顯增加、最大卵泡直徑明顯減小。
　　 加味逍遙

5、散湯劑與顆粒劑比較:與正?？瞻捉M比較，加味逍遙散湯劑與顆粒劑均能有效的促進(jìn)卵泡發(fā)育、減低催乳素水平的作用;從促卵泡發(fā)育及降催乳素比較，兩種劑型無(wú)差異。
　　 卵巢顆粒細(xì)胞凋亡通路的研究:與正?？瞻捉M相比，陰性對(duì)照組泌乳素水平明顯升高;各治療組可降低泌乳素水平，可有效改善卵泡發(fā)育。加味逍遙散可使卵巢顆粒細(xì)胞bcl-2表達(dá)明顯增強(qiáng)，Bax表達(dá)減弱，Bcl-2/Bax比例增加，從而抑制卵巢細(xì)胞凋亡。
　　 結(jié)論:胃復(fù)安3組血清