阿托伐他汀在大鼠頸總動脈球囊損傷模型中對NF-κB及其相關炎性因子的影響.pdf

1、目的：
　　 近年來，冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。ü谛牟。┏蔀槲：θ祟惤】档淖锟準字唬S著醫(yī)學水平的進步，經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(PCI)成為治療冠心病的有效手段，但是再狹窄(RS)仍是制約這一技術應用的主要問題。大量研究證實，再狹窄的機制主要由于球囊擴張和支架置入時導致血管壁損傷，斑塊破裂，引起局部的炎癥反應，進而導致平滑肌細胞的增殖和移行。本文通過模擬臨床PCI術后再狹窄，建立大鼠頸總動脈球囊損傷模型，觀察阿托伐他汀(ato

2、rvastatin)對血管壁損傷后內膜增生及對細胞核轉錄因子κB(NF-κB)及其相關下游因子的影響，探討阿托伐他汀防治再狹窄的可能作用機制。
　　 實驗方法:
　　 1、建立大鼠頸動脈球囊損傷模型：健康雄性Wista大鼠48只，體重300～350g，隨機分為三組，各為16只，阿托伐他汀干預組為實驗組，通過灌胃法給予阿托伐他汀(10mg/kg/d)；安慰劑對照組為模型組，給予等量水：空白對照組為假手術組，只分離出左頸總動

3、脈后縫合，不作球囊損傷處理，給予等量水。藥物干預3天后實驗組與模型組行左側頸總動脈內膜球囊損傷術，術后實驗組繼續(xù)每日給予阿托伐他汀，模型組及假手術組給予等量水，每組中各有4只于術后1、3、7、14天分別處死，采集頸動脈損傷段標本。
　　 2、采用HE染色方法觀察內膜增生，并應用Image J圖像分析軟件進行圖像編輯，分別測量血管內膜和中膜橫斷面的面積，以及外彈力膜內橫截面積(EEL)，計算內膜／中膜面積比。每只動物隨機選取5張切

4、面進行圖像分析，取平均值。
　　 3、采用免疫組織化學染色方法檢測血管平滑肌特異肌動蛋白(α-SMA)及VCAM-1、ICAM-1、MCP-1炎性因子的表達，計算陽性細胞百分比。通過下面公式計算：陽性細胞百分比=DAB（顯色劑）顯色的陽性細胞核或胞質／（蘇木素染色的細胞核或胞質+DAB染色的陽性細胞核或胞質）×100％。并隨機選取5張切片，以PBS替代一抗作為陰性對照組，
　　 4、結果采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理，

5、兩個均數(shù)比較采用t檢驗，多組樣本間均數(shù)兩兩比較采用LSD-t檢驗，P＜0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 實驗結果:
　　 1、血管形態(tài)學動態(tài)變化
　　 光鏡下，假手術組大鼠頸動脈內膜僅見單層內皮細胞，內彈力膜完整。球囊損傷后即刻，可見動脈內皮剝脫；模型組球囊損傷術后14天，頸動脈新生內膜呈均一或不均增厚，管腔呈向心性或偏心性狹窄，內膜增生明顯，說明已形成典型的損傷后內膜增生動物模型。治療組與同一時間點模型組相

6、比，內膜增生明顯減輕，差異有顯著性（P＜0.01）。
　　 2、免疫組化染色后NF-κB、α-SMA及ICAM-1、VCAM-1、MCP-1炎性因子的表達
　　 陰性對照組可見背景為棕褐色，蘇木素復染后胞核呈藍色，未見特異性染色。α-SMA免疫組化染色表明新內膜中增生的細胞主要為平滑肌源性。模型組血管新生內膜中NF-κB及炎性因子ICAM-1、VCAM-1、MCP-1的表達顯著高于假手術組(P＜0.001)；阿托伐他汀組