過敏性紫癜患兒腸道菌群B-E值變化與血漿IFN-γ、IL-4關(guān)系的研究.pdf

1、目的:過敏性紫癜(Henoch-Schonlcin purpura,HSP)是兒童時期最常見的小血管的炎癥性疾病之一,發(fā)病率呈逐年上升趨勢,臨床上以非血小板減少性紫癜、關(guān)節(jié)炎或關(guān)節(jié)痛、腹痛、胃腸道出血及腎炎為主要表現(xiàn)。對于HSP發(fā)病機制的研究眾多,但觀點不盡相同,近年來研究顯示其存在著明顯的免疫功能紊亂,細胞因子在其發(fā)病機制中的作用引人關(guān)注;IFN-γ(干擾素-γ)和IL-4(白介素-4)是抗原刺激的CD4+T細胞產(chǎn)生的具有代表性的細胞

2、因子,本研究通過測定二者在不同發(fā)病階段的水平變化,以探討IFN-γ和IL-4在過敏性紫癜兒童外周血中的變化情況,并闡述其臨床意義;同時測定過敏性紫癜患兒急性期及恢復(fù)期糞便中雙歧桿菌(bifidobacteria)和大腸桿菌(bacillus coli,E.coli)的數(shù)量及B/E值,從微生態(tài)學(xué)角度闡釋腸道菌群失調(diào)與兒童過敏性紫癜之間的關(guān)系,為今后益生菌類制劑防治兒童過敏性疾病提供理論依據(jù)。
　　 方法:采集2010年10月-20

3、11年2月在河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院兒科住院的過敏性紫癜患兒37例(A組),符合1990年美國風(fēng)濕病協(xié)會(ARA)制定的過敏性紫癜(HSP)診斷標(biāo)準?；純壕鶠槌醢l(fā)病兒,不伴有明顯的感染癥狀和體征,入院前未采取任何治療措施,尿常規(guī)未見異常;過敏性紫癜患兒組(A組)中,根據(jù)病程分為過敏性紫癜急性期組(A1組)和過敏性紫癜恢復(fù)期組(A2組),B組為同期來我院健康查體28例兒童。A、B兩組患兒的一般狀況包括性別、年齡、體重比較均無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0

4、.05)。實驗方法:1.采用酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)對測定血漿中IFN-γ、IL-4水平并計算IFN-γ/IL-4;2.應(yīng)用細菌16SrDNA熒光定量PCR技術(shù)檢測糞便中雙歧桿菌和大腸桿菌數(shù)量,并計算雙歧桿菌/大腸桿菌(B/E)值;所得數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理。對所得數(shù)據(jù)進行正態(tài)性檢驗和方差齊性檢驗,符合條件者以均數(shù)±標(biāo)準差(-X±s)表示

5、,方差齊用兩獨立樣本t檢驗,方差不齊用兩獨立樣本t‘檢驗。相關(guān)分析采用pearson直線相關(guān)分析,以P＜0.05為檢驗水準。
　　 結(jié)果:
　　 1、各組兒童腸道菌群結(jié)構(gòu)變化:
　　 主要檢測糞便中雙歧桿菌、大腸桿菌數(shù)量及B/E值
　　 1.1 A組與B組比較:A組患兒腸道雙歧桿菌和大腸桿菌數(shù)量、B/E值均低于B組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均＜0.05)(見Table2)。
　　 1.2 A1組與A2

6、組比較:A1組患兒腸道雙歧桿菌數(shù)量低于A2組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);A1組患兒腸道大腸桿菌數(shù)量低于A2組,有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);B/E值兩組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)(見Table3)。
　　 2、各組兒童血漿中IFN-γ、IL-4(pg/ml)細胞因子水平變化;
　　 2.1 A組與B組比較:A組患兒血漿中IFN-γ水平低于B組,有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);A組患兒血漿中IL-4水平高于B組

7、,有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)(見Table4)。
　　 2.2 A1組與A2組比較:A1組患兒血漿中IFN-γ水平與A2組比較,無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);A1組患兒血漿中IL-4水平高于A2組,有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)(見Table5)。
　　 3、血漿IFN-γ/IL-4：
　　 3.1 A組患兒血漿IFN-γ/IL-4值低于B組,有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)(見Table4)。
　　 3.2

8、 A1組患兒血漿IFN-γ/IL-4值低于A2組,有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)(見Table5)。
　　 4過敏性紫癜患兒腸道B/E值與血漿IFN-γ/IL-4值相關(guān)性分析示:B/E值與血漿IFN-γ/IL-4值兩者之間存在直線正相關(guān)關(guān)系(r=0.770,P＜0.05)(見Fig.5)。
　　 結(jié)論:
　　 1、過敏性紫癜兒童急性期出現(xiàn)腸道菌群失調(diào),表現(xiàn)在雙歧桿菌數(shù)量減少和B/E值的降低。隨著臨床癥狀的改善,腸道

9、菌群有所扶正,但落后于癥狀的恢復(fù),在恢復(fù)期腸道菌群仍處于紊亂狀態(tài)。
　　 2、Th1/Th2細胞失衡是經(jīng)典的過敏性紫癜免疫學(xué)機制,反映在自分泌細胞因子IFN-γ和IL-4水平的失衡,IFN-γ/IL-4降低,以Th2細胞分泌IL-4水平增高,Th2應(yīng)答活躍為其特點。
　　 3、過敏性紫癜患兒存在腸道微生態(tài)的失調(diào)和經(jīng)典的Th1/Th2失衡,表現(xiàn)在B/E值與Th1/Th2細胞分化呈直線正相關(guān)關(guān)系。表明腸道菌群失調(diào)所誘導(dǎo)的輔助