冠心Ⅱ號心臟保護作用的物質基礎及其舒張大鼠胸主動脈機制的研究.pdf

1、背景:方劑是中醫(yī)臨床治療疾病的主要工具與手段，其臨床療效經過幾千年的實踐已毋庸置疑。但是是什么活性成分產生了方劑療效作用，機制是什么，該問題一直是長期存在的重大問題，也是制約中醫(yī)藥現(xiàn)代化的瓶頸。本課題擬采用BAP策略研究冠心Ⅱ的心臟保護作用的物質基礎和其舒張大鼠胸主動脈環(huán)的機制，從而解決這長期困擾中醫(yī)藥學術界的難題。
　　 1、冠心Ⅱ心臟保護作用的物質基礎研究回顧
　　 目的:回顧冠心Ⅱ號和其吸收活性物質FTAPE單獨和

2、聯(lián)合應用對大鼠的心臟保護作用。方法:利用我課題組資料，采用結扎左冠狀動脈前降支法建立大鼠急性心肌梗死模型。用HPLC測得冠心Ⅱ號的五種主要成分含量(mg/g)如下:丹參素:0.936±0.013;阿魏酸:0.169±0.004;羥基紅花黃色素A:2.591±0.021;原兒茶醛0.018±0.001(P);芍藥苷3.715±0.123(E)。FTAPE單獨和聯(lián)合應用和母方療效比較。結果:將FTA混合物與母方療效比較，F(xiàn)AT劑量等于母方中

3、含量兩者心臟保護作用療效類似。結論:冠心Ⅱ號的心臟保護作用是由吸收的FTA三成分引起的。
　　 2、丹參素舒張大鼠胸主動脈機制研究
　　 目的:明確丹參素對大鼠離體血管環(huán)張力的影響，探討其具體機制。
　　 方法:采用大鼠離體胸主動脈灌流技術，以累積濃度法觀測丹參素（10-1M～10-6M）對基礎狀態(tài)、苯丙腎上腺素(1μmol/L)和氯化鉀KCl(60mmol/L)預收縮的血管環(huán)張力的影響;運用一氧化氮合酶抑制劑N

4、-硝基-L-精氨酸甲酯(10μmol/L)、鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑亞甲藍（10μmol/L）、環(huán)氧合酶抑制劑吲哚美辛（10μmol/L）處理血管環(huán)，探討影響血管環(huán)張力的機制。結果:對基礎狀態(tài)或氯化鉀(60mmol/L)預收縮的血管環(huán)無影響，而對苯丙腎上腺素(1μmol/L)預收縮的內皮完整血管環(huán)產生濃度依賴性的舒張作用，并且去除內皮后的舒張作用被取消。用N-硝基-L-精氨酸甲酯（10μmol/L）和亞甲藍（10μmol/L）預處理后，均可阻

5、斷的舒張血管作用，而用吲哚美辛（10μmol/L）預處理后未能阻斷的血管舒張作用。結論:丹參素(T)(10-1M～10-6M)通過NO-sGC-cGMP途徑產生內皮依賴的血管舒張作用。
　　 3、阿魏酸舒張大鼠胸主動脈機制研究
　　 目的:明確阿魏酸對大鼠離體血管環(huán)張力的影響，探討其具體機制。
　　 方法:采用大鼠離體胸主動脈灌流技術，以累積濃度法觀測阿魏酸(10-1mM～103mM)對基礎狀態(tài)、苯丙腎上腺素(1

6、μmol/L)和氯化鉀（60mmol/L）預收縮的血管環(huán)張力的影響;在無鈣K-H液中，以累積濃度法觀測阿魏酸(10-1mM～103mM)對苯丙腎上腺素和咖啡因預收縮的血管環(huán)張力的影響;分別運用鉀通道阻斷劑四乙胺(10mmol/L)、格列本脲(10μmol/L)、氯化鋇(1 mmol/L)、4-氨基吡啶(1mmol/L)處理血管環(huán)，探討影響血管環(huán)張力的機制。結果:對基礎狀態(tài)或氯化鉀(60mmol/L)預收縮的血管環(huán)無影響，而對苯丙腎上腺素

7、（1μmol/L）預收縮的內皮完整和去內皮的血管環(huán)產生濃度依賴性的舒張作用，并且去除內皮后的舒張作用未受影響。在無鈣K-H液中，可舒張咖啡因(20mol/L)預收縮的血管環(huán)。格列本脲可部分阻斷阿魏酸（10-1mM～103mM）舒張血管環(huán)的作用。結論:我們最終認為阿魏酸(F)(10-1mM～103mM)舒張血管環(huán)的機制是非內皮依賴性的，是通過阻滯ROC進一步抑制細胞內肌漿網中ryanodine或咖啡因敏感鈣池的Ca2+釋放和一定程度上是通

8、過開放ATP敏感性鉀通道(ATP-Sensitive potassium channel，KATP)而實現(xiàn)的。
　　 4、羥基紅花黃色素A舒張大鼠胸主動脈機制研究
　　 目的:明確羥基紅花黃色素A對大鼠離體血管環(huán)張力的影響，探討其具體機制。方法:采用大鼠離體胸主動脈灌流技術，以累積濃度法觀測羥基紅花黃色素A(10-1M～10-6M)對基礎狀態(tài)、苯丙腎上腺素（1μmol/L）和氯化鉀(60mmol/L)預收縮的血管環(huán)張力的

9、影響;運用一氧化氮合酶抑制劑N-硝基-L-精氨酸甲酯環(huán)氧合酶抑制劑環(huán)氧合酶抑制劑吲哚美辛處理血管環(huán);在無鈣K-H液中，以累積濃度法觀測阿魏酸對苯丙腎上腺素（1μmol/L）和咖啡因(20mol/L)預收縮的血管環(huán)張力的影響;另外分別運用鉀通道阻斷劑四乙胺(10mmol/L)、格列本脲（10μmol/L）、氯化鋇(1mmol/L)、4-氨基吡啶(1mmol/L)處理血管環(huán)，探討影響血管環(huán)張力的機制。結果:對基礎狀態(tài)預收縮的血管環(huán)無影響，而

10、對氯化鉀和苯丙腎上腺素預收縮的內皮完整血管環(huán)產生濃度依賴性的舒張作用，并且去除內皮后的舒張作用被部分抑制。用左吲哚美辛（10μmol/L）預處理后，可部分阻斷的舒張血管作用，而用N-硝基-L-精氨酸甲酯(10μmol/L)預處理后未能阻斷的血管舒張作用。在無鈣K-H液中，可舒張苯丙腎上腺預收縮的血管環(huán)。4-氨基吡啶(1mmol/L)可部分阻斷阿魏酸舒張血管環(huán)的作用。結論:綜上所述，我們最終認為羥基紅花黃色素A(A)(10-1M～10-6

11、M)舒張血管環(huán)的機制是內皮依賴性和非內皮依賴性兩種機制共同作用的結果。其中內皮依賴性舒張機制是通過前列腺素類物質的產生與特異性受體結合后發(fā)揮擴張血管的作用;非內皮依賴性是通過通過阻滯ROC和VOC進一步抑制細胞內IP3敏感Ca2+通道的開放和一定程度上是通過開放電壓依賴型鉀通道(voltage dependent potassium channel，KV)而實現(xiàn)的。
　　 總結:冠心Ⅱ號有多靶點的心臟保護作用，我們證明FTA是心