MPO基因多態(tài)性、MPO蛋白與冠心病的相關(guān)性研究.pdf

1、第一章:MPO基因多態(tài)性與冠心病易感性的Meta分析
　　研究背景：
　　冠心病(coronary artery disease，CAD)是全世界范圍內(nèi)發(fā)病率第一位的心血管疾病。在中國(guó)，由于危險(xiǎn)因素如肥胖、高血壓、高脂血癥、糖尿病的盛行，使得CAD發(fā)病率迅速上升。雖然冠心病的發(fā)生機(jī)制非常復(fù)雜，但各種病理因素導(dǎo)致的炎癥及氧化應(yīng)激反應(yīng)越來越受到廣大醫(yī)學(xué)者的重視。髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)是由活化的中性

2、粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、組織巨噬細(xì)胞分泌的一種血紅素蛋白，能生成活性氧簇，在免疫系統(tǒng)和炎癥調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用，涉及很多疾病進(jìn)程。國(guó)內(nèi)外研究均已證明血漿MPO水平與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病，即CAD的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。MPO基因-463位點(diǎn)和-129位點(diǎn)存在單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)，可以對(duì)MPO的表達(dá)及活性進(jìn)行調(diào)控。進(jìn)而，一些學(xué)者對(duì)MPO-基因多態(tài)性與CAD易感性的相關(guān)性進(jìn)行研究，

3、但結(jié)果不一。一些研究報(bào)道MPO基因中A等位基因可降低CAD患病風(fēng)險(xiǎn)，但是另一些研究卻發(fā)現(xiàn)MPO基因多態(tài)性與CAD的發(fā)生無關(guān)。因此MPO基因多態(tài)性是否會(huì)增加CAD的易感性，目前尚無定論。本項(xiàng)研究通過檢索所有相關(guān)性研究，利用Meta分析的方法，明確MPO基因多態(tài)性和冠心病易感性是否有關(guān)，從而加深冠心病病因的了解，為冠心病預(yù)防和治療提供新的方向。
　　方法：
　　利用“髓過氧化物酶”、“MPO”、“基因多態(tài)性”、“冠心病”、“CA

4、D”、“CHD”為關(guān)鍵詞，檢索CNKI、萬方、Pubmed、Web ofSCI數(shù)據(jù)庫(kù)從建庫(kù)到2013年3月期間在公開刊物上發(fā)表的相關(guān)性研究。通過Stata12.0軟件用固定效應(yīng)或隨機(jī)效應(yīng)模型合并相對(duì)危險(xiǎn)度（odds ratio，OR值）及其95％可信區(qū)間(confidence interval，CI)。應(yīng)用亞組分析來進(jìn)一步探討研究間異質(zhì)性的可能來源。通過Begg's漏斗圖和Egger's線性回歸圖對(duì)各研究的發(fā)表偏倚進(jìn)行檢測(cè)。
　　

5、結(jié)果：
　　共納入17篇文獻(xiàn)，共包括3962冠心病患者和3407病例對(duì)照，Meta分析顯示各基因型合并后的OR值及95％CI。針對(duì)MPO-463G/A基因多態(tài)性位點(diǎn)，共納入文獻(xiàn)15篇，共3449例冠心病患者，3082例健康對(duì)照者，A等位基因在CAD患者中的頻率為0.213，對(duì)照組人群中為0.265。A等位基因與G等位基因比較，OR=0.58，95％ CI(0.47-0.72)?；蛐虶G在CAD患者中的基因型頻率為0.61，在健康

6、對(duì)照組中的基因型頻率為0.55。基因型AA+AG與GG比較，OR=0.58，95％ CI(0.46-0.72)。在歐洲人群亞組中，AA+AG對(duì)GG的OR=0.79，95％ CI(0.58-1.08);在穩(wěn)定型心絞痛亞組中，A對(duì)G的OR=0.45，95％ CI(0.15-1.37);AA+AG對(duì)GG的OR=0.57,95％ CI(0.19-1.65)。針對(duì)MPO-129 G/A基因多態(tài)性位點(diǎn)，共納入文獻(xiàn)3篇，共1535例CAD患者，165

7、5例健康對(duì)照者，文獻(xiàn)中未給出等位基因分布數(shù)值，只給出了基因型分布情況，GG基因型在CAD患者中的基因型頻率為0.84，在健康對(duì)照組中的基因型頻率也為0.84，GG對(duì)AA+AG的OR=0.91,95％ CI(0.74-1.10)。
　　結(jié)論：
　　人類MPO-463G/A基因多態(tài)性位點(diǎn)上A等位基因可降低人群冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，MPO-129 G/A基因多態(tài)性位點(diǎn)與冠心病易感性無相關(guān)性。
　　第二章：MPO對(duì)血管舒張功能的影

8、響
　　研究背景：
　　髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)是存在于中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及巨噬細(xì)胞中中的一種過氧化物酶，也是中性粒細(xì)胞中高表達(dá)的一種血紅素蛋白酶，約占中性粒細(xì)胞蛋白含量的5％，被認(rèn)為是人類宿主免疫的重要組成部分。研究表明，MPO在冠心病患者血漿中表達(dá)顯著升高，是冠心病二級(jí)預(yù)防的生化標(biāo)記物[51]。同時(shí)，在動(dòng)脈粥樣斑塊中也可被檢測(cè)，參與斑塊動(dòng)態(tài)變化及血管病理生理過程[52]。此外，還可以根據(jù)患

9、者體內(nèi)MPO水平對(duì)患者病情進(jìn)行分級(jí)[53]。以上均說明，MPO與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病密切相關(guān)。而MPO同時(shí)被證實(shí)是一種血管舒張因子一氧化氮(notric oxide，NO)代謝酶。生理情況下，MPO在協(xié)同底物H2O2存在條件下，能催化消耗NO，調(diào)節(jié)其生物活性平衡[54]。在病理狀態(tài)下，過多生成的過氧化物能直接與NO反應(yīng)形成過氧亞硝酸鹽，或者在氧化酶的催化下，NO被氧化成亞硝酸鹽，從而導(dǎo)致NO生物活性降低[55]。MPO來源的HClO

10、亦可氧化修飾生成NO的L-精氨酸，通過降低底物濃度，直接影響NO的生成[56]。目前已經(jīng)公認(rèn)，NO生成及滅活異常是各種病理因素導(dǎo)致內(nèi)皮功能不全，以及血管舒張功能障礙的主要原因[57]。綜上所述，我們有理由推測(cè)MPO在CAD中的作用可能與其調(diào)節(jié)NO代謝促血管功能障礙有關(guān)。本項(xiàng)研究通過三部分實(shí)驗(yàn)，探討髓過氧化物酶對(duì)內(nèi)皮依賴及非內(nèi)皮依賴性血管舒張功能的影響。
　　方法：
　　本實(shí)驗(yàn)分為三個(gè)部分:1）MPO對(duì)內(nèi)皮依賴性血管舒張功能的

11、影響;2）MPO對(duì)非內(nèi)皮依賴性血管舒張功能的影響;3）低分子肝素改善MPO誘導(dǎo)的血管舒張功能障礙。離體SD大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)，應(yīng)用苯腎上腺素(Phenylephrine，PE)預(yù)收縮血管，觀察血管環(huán)對(duì)促內(nèi)皮來源NO生成的乙酰膽堿(Acetylcholine，Ach)、外源性NO供體硝普鈉(Sodium Nitroprusside，SNP)的舒張反應(yīng);觀察應(yīng)用MPO預(yù)孵育血管環(huán)組織后，Ach和SNP舒血管效應(yīng)的變化;觀察血管環(huán)隨Ach濃度改變

12、的舒張反應(yīng);觀察應(yīng)用MPO孵育、MPO+低分子肝素（Low Molecular Heparin，LMWH）孵育后，血管環(huán)隨Ach濃度改變的舒張反應(yīng)的變化。
　　結(jié)果：
　　1) MPO可損傷乙酰膽堿誘導(dǎo)的內(nèi)皮依賴性血管舒張效應(yīng)。
　　2) MPO可降低外源性NO供體SNP所致的非內(nèi)皮功能依賴性血管舒張作用。
　　3) LMWH可減少M(fèi)PO所致的血管內(nèi)皮功能障礙。
　　結(jié)論：
　　MPO可降低乙酰膽堿誘