Homer1a在2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注后心室非梗死區(qū)重構(gòu)中的作用.pdf

1、目的：冠心病幾乎占糖尿病患者死亡率的50％，是非糖尿病患者的2~4倍，目前已知的減輕心梗心肌損傷的最佳策略是通過溶栓治療或經(jīng)皮冠脈支架植入術(shù)（PCI）等手段迅速恢復(fù)冠脈血流，但是，由此產(chǎn)生的心肌再灌注損傷會進一步損傷心肌，加大最終梗死面積。缺血預(yù)處理（IPC）是已知心肌保護作用最強的機體內(nèi)源性保護機制，然而，大量研究證實，在糖尿病，無論是患者還是模型，IPC的保護作用均不明顯。ERK屬于再灌注損傷挽救激酶，在肥大心肌，Homer1a表達

2、上調(diào)可以干擾ERK的激活。本研究試圖探明其在糖尿病心肌再灌注損傷后心室非梗死區(qū)重構(gòu)中的表達變化及意義。
　　方法：（1）通過建立2型糖尿病大鼠模型及在此基礎(chǔ)上建立2型糖尿病大鼠心肌梗死和缺血/再灌注模型，檢測Homer1a在模型大鼠心肌細胞中的表達。
　?。?）通過高糖高胰島素環(huán)境培養(yǎng)H9C2細胞以及采用同時撤除培養(yǎng)基和氧氣的方法模擬細胞缺血，觀察高糖高胰島素環(huán)境和缺血/再灌注誘導(dǎo)H9C2細胞Homer1a的表達。
　

3、?。?）通過合成特異性沉默Homer1a的siRNA以沉默Homer1a的表達，沉默后的細胞在高糖高胰島素培養(yǎng)環(huán)境下給予缺血/再灌注處理，采用流式細胞儀檢測細胞凋亡率。
　?。?）將轉(zhuǎn)染了siRNA的H9C2細胞在高糖高胰島素環(huán)境下培養(yǎng)并給予缺血/再灌注處理，檢測siRNA組和ncRNA組ANP的表達水平。
　?。?）沉默Homer1a后，觀察ERK1/2在高糖高胰島素環(huán)境和缺血/再灌注后磷酸化水平的改變。
　　結(jié)果：

4、（1）糖尿病、心肌梗死、心肌缺血/再灌注均可以誘導(dǎo)非梗死區(qū)心肌細胞Homer1a表達的上調(diào)，且在糖尿病大鼠，這種上調(diào)更加明顯。
　?。?）高糖高胰島素環(huán)境和缺血/再灌注均可以誘導(dǎo)H9C2細胞Homer1a表達的上調(diào)，且在高糖高胰島素環(huán)境下，缺血/再灌注誘導(dǎo)的Homer1a表達上調(diào)更加明顯。
　　（3）轉(zhuǎn)染了siRNA的H9C2細胞凋亡率為顯著低于ncRNA組。提示高糖高胰島素環(huán)境下缺血/再灌注時Homer1a表達的上調(diào)促進了

5、心肌細胞的凋亡。
　?。?）siRNA組ANP的表達水平高于ncRNA組，提示Homer1a表達的上調(diào)可能對糖尿病心肌缺血/再灌注后心室重構(gòu)過程中的心肌細胞肥大有一定的抑制作用。
　?。?）Homer1a的表達在高糖高胰島素環(huán)境和缺血/再灌注都無明顯變化；高糖高胰島素環(huán)境和缺血/再灌注可以激活ERK1/2，且ERK1/2的激活程度在轉(zhuǎn)染Homer1asiRNA的H9C2細胞中更加顯著。
　　結(jié)論：通過以上研究我們發(fā)現(xiàn)，