尼妥珠單抗逆轉(zhuǎn)放射抵抗食管癌KYSE150R細胞放射抵抗的研究.pdf

1、研究背景：
　　食管癌在全世界男、女性癌癥死亡率中分別排第5位和第8位，而我國的食管癌病人約占世界的1/2。大部分病人診斷時已是中晚期，目前的治療手段均不能獲得很好的療效。放療在食管癌治療中占有重要地位，而食管癌的放射抵抗性是影響其療效的關(guān)鍵因素。研究顯示EGFR與食管癌放射抵抗性密切相關(guān)。約68.2％食管鱗癌和32％食管腺癌中均存在EGFR過表達，其過表達與不良預(yù)后相關(guān)。尼妥珠單抗是一種人源化的單克隆抗體，其療效與其它抗EGFR

2、抗體相同或更好，且副作用輕微，無嚴重的皮膚、腎臟和胃腸粘膜等毒性，安全性優(yōu)于其它單抗。然而，目前尚無尼妥珠單抗在逆轉(zhuǎn)放射抵抗食管癌細胞中所起的作用及相關(guān)機制的相關(guān)研究，本研究中，我們對此進行了探討，并提出了尼妥珠單抗作為放射抵抗食管癌放射增敏劑的潛在價值和深遠的臨床意義。
　　實驗方法及結(jié)果：
　　1、放射抵抗食管癌KYSE-150R細胞和食管癌KYSE-150細胞在放療前后的EGFR及p-EGFR表達變化
　　研究E

3、GFR及p-EGFR在食管癌KYSE150及KYSE150R細胞中的表達情況對于建立以EGFR傳導(dǎo)通路抑制為靶點的放射增敏的策略是非常必要的。我們以食管癌KYSE150及放射抵抗KYSE150R細胞為研究對象，通過West blot檢測EGFR及p-EGFR在上述2種細胞放療前后的表達情況，發(fā)現(xiàn)放療后2種細胞的p-EGFR表達均較放療前增加，但放射抵抗KYSE150R細胞中p-EGFR表達增加的更明顯，而EGFR表達在2種細胞及放療前后

4、均無明顯差異。說明EGFR傳導(dǎo)通路的激活可能與KYSE150R細胞放射抵抗相關(guān)，建立了EGFR傳導(dǎo)通路抑制作為放射增敏靶點的必要性及潛在的價值。
　　2、EGFR抑制劑尼妥珠單抗增強了放射抵抗食管癌KYSE-150R細胞的放療敏感性
　　EGFR抑制劑可以提高腫瘤細胞的放射敏感性，尼妥珠單抗是一種人源化的單克隆抗體，其療效與其它單克隆抗體相同或更好，而安全性更優(yōu)。因此，我們選擇尼妥珠單抗作為研究對象，通過克隆生存實驗、細胞增

5、殖抑制實驗證實了尼妥珠單抗作用于放射抵抗食管癌KYSE-150R細胞后其對放療的敏感性明顯增加，逆轉(zhuǎn)了食管癌KYSE-150R細胞的放射抵抗性。
　　3、EGFR抑制劑尼妥珠單抗逆轉(zhuǎn)放射抵抗的食管癌KYSE-150R細胞放射敏感性的機制研究
　　研究尼妥珠單抗放射增敏機制對于指導(dǎo)其臨床應(yīng)用具有重要意義。本研究中，我們通過γ(-)H2AX焦點分析法檢測了尼妥珠單抗對放射抵抗食管癌KYSE-150R細胞的DNA雙鏈斷裂(DSBs

6、)修復(fù)動力學(xué)的改變，證明尼妥珠單抗可能通過延遲放療后的DSBs修復(fù)起到放射增敏作用。
　　結(jié)論：
　　1、首次研究了p-EGFR在放射抵抗食管癌KYSE150R細胞放療前后的表達情況，證明了放療后KYSE150R細胞中p-EGFR表達增加較KYSE150更明顯，可能是其放射抵抗產(chǎn)生的原因之一，我們提出在放射抵抗的食管癌KYSE150R細胞中，使用EGFR抑制劑逆轉(zhuǎn)其放射抵抗性的治療策略有重要臨床意義。
　　2、使用尼妥

7、珠單抗抑制EGFR傳導(dǎo)通路，在體外實驗中證明尼妥珠單抗可以增加食癌KYSE150R細胞對放射線的敏感性，逆轉(zhuǎn)其放射抵抗性。
　　3、首次研究了尼妥珠單抗作用于食癌KYSE150R細胞后對其放療后DNA損傷修復(fù)的影響，證明了尼妥珠單抗逆轉(zhuǎn)食癌KYSE150R細胞放射抵抗性可能通過顯著延遲電離輻射誘導(dǎo)的DNA損傷修復(fù)實現(xiàn)。本研究證明了EGFR抑制劑尼妥珠單抗作為放射抵抗食管癌KYSE150R放射增敏劑的可行性，為尼妥珠單抗用于放射抵抗