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1、目的:應(yīng)用拉曼光譜技術(shù)研究尼妥珠單抗?jié)舛群蜁r(shí)間因素對(duì)鼻咽癌CNE-2細(xì)胞作用效果的影響。
方法:培養(yǎng)并收集生長(zhǎng)狀態(tài)良好的人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞,接種于四個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。向4個(gè)培養(yǎng)瓶中分別加入0,40ug/ml,150ug/ml,200ug/m四種濃度的尼妥珠單抗注射液各2ml,置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。采用Renishaw激光顯微共焦拉曼光譜儀對(duì)四種藥物濃度培養(yǎng)的CNE-2細(xì)胞進(jìn)行測(cè)量。每個(gè)藥物濃度組測(cè)量20個(gè)細(xì)胞,將測(cè)得的
2、光譜進(jìn)行PCA-LDA統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,尋找最佳藥物作用濃度。再將CNE-2細(xì)胞接種于另外三個(gè)培養(yǎng)瓶中,分別加入最佳藥物濃度的尼妥珠單抗注射液各2ml,置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)24h、48h、72h后進(jìn)行拉曼光譜測(cè)量。
結(jié)果:尼妥珠單抗注射液作用24h后,40ug/ml組的CNE-2細(xì)胞平均拉曼光譜與對(duì)照組無(wú)明顯差別,150ug/ml組部分譜峰出現(xiàn)差別,200ug/ml組多個(gè)譜峰出現(xiàn)明顯差別。經(jīng)過(guò)PCA-LDA統(tǒng)計(jì)分析,隨著藥物濃度
3、的提高,藥物組與對(duì)照組的分離趨勢(shì)越發(fā)明顯,200ug/ml時(shí),藥物組和對(duì)照組能夠完全區(qū)分。40ug/ml,150ug/ml,200ug/ml時(shí)判別的靈敏度分別為60%、85%、100%;特異度分別為70%、70%和100%。200ug/ml藥物濃度下,24h組、48h組、72h組的拉曼光譜表現(xiàn)出明顯的差異,但并未表現(xiàn)出與作用時(shí)間相關(guān)的變化趨勢(shì)。
結(jié)論:拉曼光譜分析表明,在24h作用時(shí)間下,尼妥珠單抗對(duì)CNE-2細(xì)胞的作用效果隨
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