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文檔簡介
1、腫瘤細胞浸潤至周圍組織及轉移至遠處器官必須首先穿越由ECM和基底膜組成的屏障。因而ECM的裂解,特別是血管基底膜的裂解十分必要。研究表明,內切糖苷酶乙酰肝素酶(heparanase,乙酰肝素酶)裂解ECM中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparansulfateprotoglycan,HSPG)分子的過程對腫瘤細胞的浸潤和轉移起著關鍵作用。許多年來已經發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞轉移潛能與乙酰肝素酶的表達密切相關,轉移性大鼠和人乳腺癌細胞株中乙酰肝素酶mRN
2、A高表達,而非轉移性細胞株低表達或不表達。原位雜交和免疫組化研究同樣發(fā)現(xiàn)侵襲性乳腺癌和結腸癌比相鄰非侵襲組織有更高乙酰肝素酶表達。進一步支持乙酰肝素酶在腫瘤轉移中的作用來自轉染研究。當淋巴瘤和黑色素瘤細胞被穩(wěn)定轉染乙酰肝素酶基因后其轉移能力得到加強。另外支持乙酰肝素酶參與腫瘤轉移的證據(jù)來自體內給予乙酰肝素酶抑制劑,當動物腫瘤模型給予乙酰肝素酶抑制劑后,腫瘤轉移發(fā)生率明顯減少(>90%)。 本研究中我們利用乙酰肝素酶反義寡核苷酸轉
3、染結腸癌細胞系LOVO,觀察對其體外侵襲能力的抑制情況。 目的:探討乙酰肝素酶(HPSE)反義寡脫氧核苷酸對人結腸癌細胞系LOVO侵襲力的抑制作用。 方法:設計合成互補于HPSEmRNA起始密碼區(qū)的硫代反義寡脫氧核苷酸AS-ODN以陽離子脂質體Lipofectin包裹后分不同濃度轉染LOVO細胞,以逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測轉染后HPSEmRNA表達的變化,以定量Matrigel侵襲實驗檢測LOVO細胞體外
4、侵襲力的變化。 結果:與正常對照組、脂質體對照組相比,AS-ODN各濃度組對HPSEmRNA的表達及細胞侵襲力均有明顯抑制作用(P<0.01),其抑制效應在不同濃度組間差別顯著(P<0.01)。AS-ODN在終濃度為0.1μmol/L、0.2μmol/L和0.4μmol/L時對LOVO細胞的侵襲力抑制率分別為32.0%、54.1%和76.3%。 結論:HPSE反義寡脫氧核苷酸通過下調HPSEmRNA的表達可顯著抑制人結腸
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