乙酰肝素酶反義寡脫氧核苷酸對乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移和血管生成的抑制作用.pdf

1、目的:1、探討HPSE在人類乳腺癌組織中的表達(dá)及其與乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移和血管生成等臨床病理特征的關(guān)系.2、探討乙酰肝素酶反義寡脫氧核苷酸(heparanase antisense oligodeoxy-nucleotide,HPSE AS-ODN)對乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移和血管生成的抑制作用,以探索新的乳腺癌基因治療手段.方法:1、對4例乳腺癌病例進(jìn)行回顧,以HPSE單克隆抗體免疫組化染色檢測乳腺癌組織HPSE表達(dá),以Ⅷ因子抗體免疫組化染色檢測微血

2、管密度(microvessel density,MVD).2、設(shè)計合成互補(bǔ)于HPSE mRNA起始密碼區(qū)的HPSE AS-ODN,以陽離子脂質(zhì)體Lipofectin包埋后轉(zhuǎn)染人乳腺癌MDA435細(xì)胞,以逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測轉(zhuǎn)染后HPSE mRNA表達(dá)的變化,以Western蛋白印跡檢測HPSE蛋白表達(dá)的變化,以Matrigel細(xì)胞侵襲實驗檢測MDA435細(xì)胞侵襲力的變化.3、建立人乳腺癌裸小鼠皮下侵襲模型,瘤內(nèi)注射H

3、PSE AS-ODN,觀察腫瘤的生長情況,并以RT-PCR檢測腫瘤組織中HPSE mRNA表達(dá),以HPSE單抗免疫組化染色和Western蛋白印跡檢測腫瘤組織中HPSE蛋白表達(dá),以Ⅷ因子免疫組化染色檢測腫瘤MVD.建立人乳腺癌裸小鼠急性血路轉(zhuǎn)移模型,通過尾靜脈注射HPSE AS-ODN,以解剖顯微鏡計數(shù)裸小鼠肺表面腫瘤轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)目.結(jié)論:HPSE表達(dá)能夠促進(jìn)乳腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移和血管生成,并與乳腺癌的預(yù)后相關(guān).HPSE AS-ODN通過下調(diào)