CD44反義寡核苷酸抑制胃癌細(xì)胞SGC7901粘附侵襲的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文CD44反義寡核苷酸抑制胃癌細(xì)胞SGC7901粘附侵襲的實(shí)驗(yàn)研究姓名：崔越宏申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：徐惠綿20020501Biotin標(biāo)記的CD44反義寡核苷酸(asODN)配合組織細(xì)胞化學(xué)方法觀察轉(zhuǎn)染后其在細(xì)胞內(nèi)的分布，并用免疫組化的方法檢測(cè)是否有蛋白表達(dá)的變化，然后用脂質(zhì)體將CD44asODN轉(zhuǎn)染SGC7901胃癌細(xì)胞系，通過lit—PCR、流式細(xì)胞術(shù)、MTY法、聚碳酸酯膜侵襲試驗(yàn)分別測(cè)定CD

2、44mRNA和細(xì)胞表面CD44蛋白表達(dá)及癌細(xì)胞粘附力、侵襲力的變化，透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)，統(tǒng)計(jì)分析采用SPSSl00軟件行配對(duì)計(jì)量資料t檢驗(yàn)。結(jié)果1生物素標(biāo)記的CD44asODN轉(zhuǎn)染SGC7901細(xì)胞3小時(shí)，未見胞漿及胞核內(nèi)出現(xiàn)明顯變化，6小時(shí)才見細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)淺棕色顆粒；2從免疫組化的結(jié)果可以看出轉(zhuǎn)染36小時(shí)后細(xì)胞C13嗎4蛋白表達(dá)有所下降；3RT—PCR結(jié)果顯示asODN組CD44／fl—actinmRNA相對(duì)定量比值(0641tO08

3、4)較對(duì)照組(08940120)顯著降低(PO05)；4流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)asODN組平均熒光指數(shù)為(20870577)較對(duì)照組(52831783)明顯下降(P005)；5粘附實(shí)驗(yàn)表明asODN組粘附力(01590025)較對(duì)照組(o2940058)顯著下降(P001)；6asODN組穿透聚碳酸酯膜的細(xì)胞數(shù)(751291)較對(duì)照組(15751708)亦有顯著降低(P001)；7透射電鏡觀察表明經(jīng)asODN作用后，癌細(xì)胞表面?zhèn)巫愫颓驙钔黄鹈黠@