主動(dòng)外排泵對(duì)銅綠假單胞菌攝入硅納米顆粒的影響.pdf

1、目的： 觀察銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa，PA)的主動(dòng)外排泵是否能將進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)的硅納米顆粒泵出，為利用硅納米顆粒作為治療PA感染的藥物載體研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 從臨床收集24株P(guān)A標(biāo)本，分別編號(hào)為S1-S24。采用瓊脂二倍稀釋法測(cè)定24株臨床菌株對(duì)12種抗生素(PA適用)的耐藥情況。RT-PCR擴(kuò)增檢測(cè)四種外排泵MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprM、

2、MexXY-OprM的表達(dá)情況。將PA臨床菌株S24及野生菌PA01中分別加入30μg/ml及6μg/ml的硅納米顆粒，取不同培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)的菌液進(jìn)行電子顯微鏡掃描，觀察菌體內(nèi)硅納米顆粒的攝入以及分布情況。檢測(cè)在PA菌液中加入了硅納米顆粒后培養(yǎng)24小時(shí)的菌落數(shù)與正常培養(yǎng)的PA菌落數(shù)。 結(jié)果： 1、24株P(guān)A對(duì)頭孢菌素類抗生素有較高的耐藥性，而對(duì)喹諾酮類抗生素相對(duì)敏感，并且所有菌株均表現(xiàn)出多藥耐藥性。RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)2

3、0株P(guān)A菌株有外排泵的表達(dá)，其中有6株能同時(shí)表達(dá)多個(gè)外排泵。而在這6株P(guān)A中，S24能同時(shí)表達(dá)MexA、MexC、MexX及MexE四種外排泵基因。PA01野生菌株僅表達(dá)MexAB-OprM。 2、通過單因素的方差分析，正常培養(yǎng)的PA01和分別加入硅納米顆粒6ug/ml和30ug/ml后的PA01菌落數(shù)比較，P>0.01，差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、硅納米顆粒在PA中的存在量不受外排泵的影響，一種或四種外排泵的存在攝入硅納