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1、目的:了解本地區(qū)臨床分離銅綠假單胞菌MexAB-OprM型外排系統(tǒng)和膜孔蛋白OprD2的表達(dá)情況及其與銅綠假單胞菌多重耐藥的關(guān)系,為臨床抗感染治療及醫(yī)院感染的監(jiān)測(cè)和控制提供循證醫(yī)學(xué)依據(jù)。
方法:2008年7月至2009年6月我院住院患者送檢標(biāo)本分離銅綠假單胞菌381株(同一患者同類標(biāo)本分離菌株不重復(fù)計(jì)入)。采用VITEK2 Compact自動(dòng)微生物分析儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏測(cè)定。選取多重耐藥(對(duì)三類或以上抗生素耐藥)的銅綠假
2、單胞菌,分別以微量肉湯稀釋試驗(yàn)檢測(cè)MexAB-OprM型主動(dòng)外排系統(tǒng)、熒光定量PCR技術(shù)對(duì)該型外排系統(tǒng)及OprD2進(jìn)行相對(duì)定量測(cè)定,對(duì)高表達(dá)MexAB菌株的調(diào)節(jié)基因mexR進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序。
結(jié)果:⑴銅綠假單胞菌的感染以兒童和老年人居首,在全院各科室中,ICU患者銅綠假單胞菌分離率最高(14.2%),從感染部位上,主要分布于呼吸道(62.2%)。⑵銅綠假單胞菌的耐藥情況相當(dāng)嚴(yán)峻,對(duì)多數(shù)常用抗生素均有較高的耐
3、藥性,但哌拉西林/他唑巴坦、丁胺卡那霉素等抗生素目前仍是治療銅綠假單胞感染的有效抗菌藥物。⑶質(zhì)子泵抑制劑CCCP對(duì)環(huán)丙沙星的抗菌效果影響較大,有15株銅綠假單胞菌的MIC下降8倍以上,其中6株的CAZ在CCCP存在的情況下MIC也下降8倍以上,另有兩株僅有頭孢他啶的MIC下降8倍以上。亞胺培南的抗菌活性基本不受CCCP的影響。⑷對(duì)頭孢他啶耐藥和敏感的兩組銅綠假單胞菌MexAB-OprM型主動(dòng)外排系統(tǒng)表達(dá)量有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),對(duì)
4、環(huán)丙沙星耐藥和敏感的兩組銅綠假單胞菌MexAB-OprM型主動(dòng)外排系統(tǒng)表達(dá)量有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),但對(duì)亞胺培南耐藥和敏感的兩組,該型外排系統(tǒng)的表達(dá)量無差別(P>0.05)。⑸mRNA相對(duì)定量與頭孢他啶的CCCP抑制試驗(yàn)結(jié)果的一致性較好,環(huán)丙沙星抑制試驗(yàn)陽(yáng)性菌株中有7株相對(duì)定量不高。⑹膜孔蛋白OprD2基因mRNA的定量檢測(cè)結(jié)果顯示,亞胺培南耐藥組的表達(dá)量低于敏感組,并且兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)
結(jié)論:①
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